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1、目的:通過(guò)抑制Shh信號(hào)通路,觀察坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷(spared nerve injury, SNI)模型大鼠的痛敏變化,并探討抑制Shh信號(hào)通路對(duì)SNI模型大鼠脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖及脊髓水平BDNF、NR2B表達(dá)的影響。
方法:Sprague-Dawley雄性大鼠96只,8周齡,體重250~300g,隨機(jī)分為4組(n=24):假手術(shù)組(control組)、坐骨神經(jīng)分支選擇性損傷組(SNI組)、溶劑對(duì)照組(SNI-veh
2、icle組)和抑制劑組(SNI-CP組)。分別于建模前1d、建模后1、7d測(cè)定機(jī)械縮足反應(yīng)閾(MWT);于建模后7d MWT測(cè)量后處死大鼠取L4-6脊髓組織,采用Western blot法測(cè)定脊髓組織Shh、Ptch、Smo、Gli1、GFAP、BDNF及NR2B蛋白表達(dá),采用實(shí)時(shí)熒光定量PC R法測(cè)定脊髓組織Shh、Ptch、Smo、Gli1、BDNF及NR2B mRNA表達(dá),采用免疫熒光法定位脊髓組織Shh及GFAP表達(dá)。
3、 結(jié)果:與control組比較:SNI組、SNI-vehicle組和SNI-CP組建模后1d即出現(xiàn)跛行、爪部畸形以及舔、咬、抖動(dòng)患側(cè)足等一般行為學(xué)表現(xiàn),于建模后1d和7d測(cè)定M WT均降低(P<0.05),脊髓組織Shh、Ptch、Smo、Gli1、BDNF、NR2B蛋白及mRNA表達(dá)和GFAP蛋白表達(dá)均上調(diào)(P<0.05);與SNI組、SNI-vehicle組比較:SNI-CP組經(jīng)環(huán)巴明處理后MWT升高(P<0.05),且脊髓組織Sh
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