丹參注射液對SD大鼠非壓迫腰椎間盤退變的實驗研究.pdf

1、目的:通過硬膜外注射制備好的退變椎間盤髓核混懸液來構建非壓迫腰椎間盤突出模型,來為臨床試驗研究提供一種較簡便的試驗模型。用丹參注射液治療SD大鼠非壓迫腰椎間盤退變的實驗室研究,為在臨床用中藥化淤止痛治法治療腰腿痛提供理論依據(jù)。通過丹參注射液的療效為中藥制劑治療和預防腰椎間盤退變等疾病提供理論依據(jù),為臨床進一步應用丹參等中藥提取物防治本病提供實驗依據(jù),為腰椎間盤退變中藥的篩選提供新的研究思路及方法。通過丹參注射液對假膜組和實驗組的臨床觀察

2、和腫瘤壞死因子-α(TNF-α)結果的比較,來研究引起退變椎間盤疼痛的根源。
　　方法:采用健康成年的96只SD大鼠隨機分成4組。正常組:24個,對照組24只,假模組24只、實驗組24只,建立非壓迫性腰椎間盤退變的模型,正常組不予處理,其余各組均使用醫(yī)用繃帶在生理彎曲范圍內將鼠尾折成―U‖型,每日早晚2次,每次1-2小時。1個月后,每隔7天分批從正常組、對照組模型中各選取4只,氯胺酮常規(guī)麻醉、選距鼠尾根部1cm處作為斷點,術區(qū)消毒

3、、鋪無菌洞巾,切斷鼠尾并縫合傷口,注射抗生素抗感染。把鼠尾的皮膚及周圍粘連的韌帶等多余組織清除掉,用生理鹽水予以沖洗干凈,用中性福爾馬林固定液來中浸泡固定成標本,放冰箱中冷藏保存24 h后,用手術刀片切開準備取的椎間盤,每條尾巴選取3個椎間盤組織已備切片。然后,把取出的椎間盤依次進行脫鈣,用酒精予以遞度脫水,常規(guī)進行石蠟包埋、切片,使用HE染色。非壓迫腰椎間盤突出模型造模成功與否由光鏡下椎間盤髓核組織學觀察來確認;髓核對大鼠腫瘤壞死因子

4、-α(TNF-α)及神經(jīng)根損傷的研究,把提取退變的髓核組織移植于假模組和實驗組大鼠的 L4/5神經(jīng)根背側,大鼠非壓迫性髓核突出造模完成。實驗組予以丹參注射液灌胃,假模組不予丹參注射液處理。于第7、15、21天各組分期處死,分別取L4/5周圍的神經(jīng)根處理、切片、染色觀察神經(jīng)根組織形態(tài)學變化。用人TNF-α試劑盒檢測各階段腫瘤壞死因子-α(TNF-α)的變化。
　　結果:實驗組神經(jīng)根細胞變化明顯,少數(shù)神經(jīng)根細胞空泡變性,細胞水腫減輕,

5、雪旺細胞增多,部分核仁消失。丹參注射液可改善損傷神經(jīng)根的組織形態(tài)病理學改變。實驗組較正常組TNF-α測定含量升高明顯,說明其是腰椎間盤突出癥疼痛的重要介質。實驗組隨治療時間的延長而 TNF-α有所下降,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05,t=2.74)
　　結論:折尾法對SD大鼠鼠尾反復持續(xù)的牽張可造成椎間盤內組織病理學的改變。丹參注射液可減輕非壓迫性腰椎間盤退變神經(jīng)根損傷所導致的組織形態(tài)病理學改變,可以有效減少實驗組大鼠神經(jīng)根的TN