針刺對(duì)大鼠多囊卵巢綜合征的治療效應(yīng)和機(jī)理研究.pdf

1、第一部分大鼠多囊卵巢綜合征模型的建立
　　 目的：運(yùn)用來(lái)曲唑（Letrozole）灌胃建立大鼠多囊卵巢綜合征動(dòng)物（PCOS）模型。
　　 方法：將20 只雌性SD大鼠隨機(jī)分為2組，模型組每日按0.1 mg/kg/d 給予來(lái)曲唑（溶于1％羧甲基纖維素)灌胃，正常對(duì)照組每日給予1％羧甲基纖維素灌胃，連續(xù)21天。每日陰道涂片觀察大鼠動(dòng)情周期；21天后處死動(dòng)物，稱取卵巢重量，肉眼觀察卵巢外形，放免法檢測(cè)血清性激素和空腹胰島素（F

2、INS）水平，同時(shí)檢測(cè)卵泡病理學(xué)改變。
　　 結(jié)果：模型組大鼠體重增加，均失去穩(wěn)定的動(dòng)情周期，處于動(dòng)情間期，雙側(cè)卵巢重量增加，肉眼觀卵巢白膜增厚，病檢結(jié)果顯示卵巢呈多囊樣改變，卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞層數(shù)減少，卵泡膜細(xì)胞增多，黃體數(shù)目顯著減少，與正常對(duì)照組相比有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)；血清雄激素（T）、黃體生成素(LH)、FINS 水平顯著高于正常對(duì)照組（P均<0.05），孕激素（P）水平明顯低于正常對(duì)照組（P<0.05），卵泡刺激素

3、（FSH）水平低于正常對(duì)照組，但差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。
　　 結(jié)論：運(yùn)用來(lái)曲唑灌胃可以建立一種理想的大鼠多囊卵巢綜合征動(dòng)物模型。
　　 第二部分針刺對(duì)大鼠多囊卵巢綜合征的治療效應(yīng)和機(jī)理研究
　　 目的：觀察針刺對(duì)大鼠多囊卵巢綜合征的治療效應(yīng)和相關(guān)機(jī)制。
　　 方法：SD大鼠40 只，隨機(jī)分為正常對(duì)照組（10 只）和造模組（30 只），造模組每日按0.1 mg/kg/d 給予來(lái)曲唑灌胃，正常對(duì)照

4、組每日給予1％羧甲基纖維素灌胃，連續(xù)21天。造模成功后每日按0.05 mg/kg/d 給予來(lái)曲唑灌胃維持模型，將造模組大鼠隨機(jī)分為模型組、針刺組、西藥組，每組各10 只。針刺組給予針刺治療，每日1次，每次留針15 min；西藥組予以克羅米芬4.5 mg/kg/d 灌胃；14天后處死動(dòng)物。稱取各組大鼠卵巢重量，放免法檢測(cè)血清性激素和FINS 水平，同時(shí)檢測(cè)卵泡病理學(xué)改變。免疫組化法檢測(cè)各組大鼠卵巢凋亡因子Fas、FasL及卵巢增殖細(xì)胞核抗

5、原（PCNA）的表達(dá)，原位末端標(biāo)記法（TUNEL）檢測(cè)卵巢細(xì)胞凋亡情況。
　　 結(jié)果：①卵巢形態(tài)學(xué)改變：與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠雙側(cè)卵巢重量增加，卵巢白膜增厚；鏡下可見卵巢呈多囊樣改變，黃體數(shù)目顯著減少，卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞層數(shù)減少，卵泡膜細(xì)胞增多。針刺組大鼠卵巢白膜增厚不明顯，黃體數(shù)目較模型組明顯增多，卵泡內(nèi)顆粒細(xì)胞層數(shù)較模型組增加(約為4～5 層)，卵泡膜細(xì)胞變薄，囊性卵泡減少。西藥組可見囊性卵泡減少，顆粒細(xì)胞層數(shù)增多，大小不

6、等的各級(jí)卵泡增多，同樣見多個(gè)黃體，有些卵巢可見未破裂黃素化囊腫。②血清學(xué)結(jié)果：與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠血清性激素T、LH和FINS 水平明顯升高（P 均<0.01），血清FSH水平明顯降低（P<0.01）；與模型組相比，針刺組和西藥組的T和FINS 水平顯著降低（P 均<0.01），LH 有下降趨勢(shì)，但無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，F(xiàn)SH 水平上升(P<0.05)。③卵巢增殖與凋亡：與正常對(duì)照組相比，模型組卵巢Fas、FasL表達(dá)水平增高（P 均<

7、0.01），卵巢PCNA表達(dá)水平降低（P<0.01），與模型組相比，針刺組、西藥組Fas、FasL表達(dá)水平均降低（P 均<0.01），但仍均高于正常對(duì)照組（P<0.05），卵巢PCNA表達(dá)水平均升高（P 均<0.01），但針刺組仍低于正常對(duì)照組（P<0.01）；與西藥組相比，針刺組FasL表達(dá)水平更低（P<0.05），其他組間比較無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。TUNEL 結(jié)果顯示模型組卵泡顆粒細(xì)胞凋亡率45.16％，正常對(duì)照組28.57％，差異具有統(tǒng)計(jì)