慢性乙型肝炎濕熱中阻證和肝郁脾虛證患者HBV特異性CTL應(yīng)答研究.pdf

1、背景和目的:慢性乙型肝炎(CHB)是嚴(yán)重危害人類(lèi)健康的疾病之一。據(jù)世界衛(wèi)生組織統(tǒng)計(jì)全世界有3.5億人攜帶乙肝病毒，每年約100萬(wàn)人因HBV感染而死亡。干擾素-α、核苷（酸）類(lèi)似物雖能降低部分患者病毒含量，但干擾素-α有效率僅為25％-40％，且其不良反應(yīng)嚴(yán)格限制了其使用范圍，而核苷（酸）類(lèi)似物有需長(zhǎng)期服藥、停藥后易復(fù)發(fā)、易產(chǎn)生耐藥性的缺點(diǎn)，更為重要的是，它們難以完全清除乙肝病毒，因此有必要積極探索治療慢性乙型肝炎的新方法?，F(xiàn)已普遍認(rèn)為乙

2、肝病毒本身對(duì)肝臟沒(méi)有損傷作用，HBV感染后主要通過(guò)機(jī)體對(duì)病毒的免疫應(yīng)答而導(dǎo)致肝細(xì)胞的損害。其中CD8+T細(xì)胞所介導(dǎo)的乙肝病毒特異性CTL應(yīng)答反應(yīng)起關(guān)鍵作用，是啟動(dòng)肝細(xì)胞損傷和清除乙肝病毒的始動(dòng)者。故探索以增強(qiáng)HBV特異性CTL應(yīng)答的方法十分必要，進(jìn)行此類(lèi)研究首要的任務(wù)是確定能誘導(dǎo)強(qiáng)的HBV特異性CTL應(yīng)答的抗原或具有廣泛免疫原性的特異性表位。中醫(yī)藥在慢性乙型肝炎治療上有獨(dú)特的優(yōu)勢(shì)，辨證論治是祖國(guó)傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)的精髓，因此有必要探討HBV特異性

3、CTL應(yīng)答與中醫(yī)證型之間關(guān)系，為慢性乙型肝炎中西醫(yī)結(jié)合治療提供理論依據(jù)。大量研究證實(shí)，機(jī)體免疫與慢性乙型肝炎中醫(yī)證型之間存在密切關(guān)系，免疫指標(biāo)檢測(cè)為中醫(yī)證型斷定提供了客觀依據(jù)，但基于慢性乙型肝炎具體中醫(yī)證型與不同誘導(dǎo)劑特異性CTL應(yīng)答之間關(guān)系尚未見(jiàn)系統(tǒng)報(bào)道。為此本研究通過(guò)HBcAg、HBsAg及混合肽段(HBcAg18-27、HBcAg60-68、HBsAg183-191)對(duì)慢性乙型肝炎患者特異性CTL應(yīng)答的影響與其不同中醫(yī)證型之間的相

4、關(guān)性觀察，為選擇更加高效的誘導(dǎo)劑誘導(dǎo)HBV特異性CTL應(yīng)答治療慢性乙型肝炎，以及指導(dǎo)中醫(yī)辨證分型提供客觀依據(jù)。
　　方法:收集據(jù)中醫(yī)辨證分型為濕熱中阻型和肝郁脾虛型的慢性乙型肝炎患者各30例，分別用重組HBcAg、HBsAg、混合肽段誘導(dǎo)CHB患者PBMC體外增殖。用酶聯(lián)免疫斑點(diǎn)(ELISPOT)法檢測(cè)抗原或肽段誘導(dǎo)后CD8+T細(xì)胞分泌IFN-γ數(shù)量反映CTL應(yīng)答水平。
　　結(jié)果:HBcAg分別與HBsAg及混合肽段誘導(dǎo)慢乙