D-IBS與FD重疊肝郁脾虛證動(dòng)物模型的建立及其中藥干預(yù)機(jī)制研究.pdf

1、腹瀉型IBS重疊FD證在中醫(yī)學(xué)中屬于“泄瀉”、“腹痛”、“痞滿”、“胃痛”、“反酸”等病證的范疇，我們的前期臨床研究表明，腹瀉型IBS重疊FD證中肝郁脾虛證最為常見。現(xiàn)在已有多種建立腸易激綜合征、FD及中醫(yī)肝郁證、脾虛證的動(dòng)物模型的報(bào)道，但腹瀉型IBS重疊FD的模型以及本病肝郁脾虛證的動(dòng)物模型研究國(guó)內(nèi)尚未見報(bào)道。鑒于此，我們?cè)趪?guó)家自然科學(xué)基金（IBS與FD重疊肝郁脾虛證神經(jīng)-免疫-內(nèi)分泌失調(diào)機(jī)制研究項(xiàng)目編號(hào):81173392）的資助下開

2、展了D-IBS與FD重疊肝郁脾虛證動(dòng)物模型的建立及其中藥干預(yù)機(jī)制研究。
　　實(shí)驗(yàn)一 腹瀉型腸易激綜合征重疊功能性消化不良肝郁脾虛動(dòng)物模型的構(gòu)建
　　目的:通過動(dòng)物的宏觀表現(xiàn)、行為變化、飲食、糖水消耗及體重變化以證實(shí)“夾尾刺激+大黃灌胃”復(fù)合法所致大鼠模型為D-IBS與FD重疊肝郁脾虛大鼠模型。
　　方法:1、對(duì)動(dòng)物的宏觀表現(xiàn)、行為變化、飲食、糖水消耗及體重變化檢測(cè);2、對(duì)大鼠曠場(chǎng)實(shí)驗(yàn)進(jìn)行分析;3、藥物測(cè)試:中藥痛瀉要方

3、合枳術(shù)丸及西藥整腸生加瑞琪的調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)果:模型組大鼠由初次夾尾刺激時(shí)的強(qiáng)烈反應(yīng)，逐漸轉(zhuǎn)變?yōu)闋?zhēng)斗有所減弱，刺激興奮性減弱、不易興奮撕打，扎堆、拱背，納差、活動(dòng)減少、拱背、毛發(fā)枯而蓬亂不澤、對(duì)外界刺激基本較少興奮、稀便、肛門污穢、體重減輕等肝郁脾虛之狀。與正常對(duì)照組比較，模型組大鼠糖水消耗百分比顯著降低(P＜0.01)，曠場(chǎng)內(nèi)平均活動(dòng)速度顯著降低(P＜0.05)。予藥物治療后對(duì)上述指標(biāo)有顯著的調(diào)節(jié)作用。
　　結(jié)論:利用夾

4、尾加大黃灌胃法造模，模擬苦寒?dāng)∥福斡羧站?，木郁乘土，肝郁脾虛的病理演變過程，且大鼠所表現(xiàn)癥狀符合腸易激綜合征重疊功能性消化不良的表現(xiàn)，成功的復(fù)制出大鼠肝郁脾虛證模型。
　　實(shí)驗(yàn)二 D-IBS與FD重疊大鼠精神狀態(tài)、胃腸激素水平改變
　　目的:采用Open-Field法測(cè)定大鼠抑郁模型行為變化，放免法及免疫組織化學(xué)染色法測(cè)定各項(xiàng)理化指標(biāo)變化，探索功能性消化不良(FD)與腹瀉型腸易激綜合(D-IBS)重疊證動(dòng)物模型的精神狀況及

5、其與腦腸肽、細(xì)胞因子水平差異的相關(guān)性。
　　方法:將50只健康Wistar雄性大鼠按隨機(jī)數(shù)字表法分組，觀察大鼠正常組及造模組行為變化、血清中血管活性腸肽(vasoactine intrestinal peptide，VIP)、生長(zhǎng)抑素(somatostatin，SS)、5-羥色胺(5-hydroxytryptamine，5-HT)、內(nèi)毒素(Endotoxins，ET)、白細(xì)胞介素-10(interleukin-10，IL-10)和

6、結(jié)腸組織中白細(xì)胞介素-2(interleukin-2，IL-2)的水平。
　　結(jié)果:與正常對(duì)照組比較，D-IBS重疊FD造模組大鼠糖水消耗百分比顯著降低(P＜0.01)，曠場(chǎng)內(nèi)平均活動(dòng)速度顯著降低(P＜0.05)，血漿生長(zhǎng)抑素顯著降低(P＜0.01)，血漿血管活性腸肽水平顯著升高(P＜0.01);血漿5-羥色胺及白細(xì)胞介素-10變化無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義，組織中IL-2表達(dá)陽(yáng)性細(xì)胞比無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;與單純D-IBS組比較，血漿ET水平顯著升高

7、。
　　結(jié)論:腹瀉型IBS重疊FD大鼠模型存在較單純腹瀉型IBS及FD大鼠模型嚴(yán)重的精神異常;其癥狀重疊可能與血漿VIP、ET水平升高及SS降低有關(guān)，與造模方法、精神異常、血漿IL-10水平及結(jié)腸組織IL-2免疫反應(yīng)細(xì)胞無明顯相關(guān)性。改變可能與造模中大鼠的下消化道癥狀密切相關(guān)。
　　實(shí)驗(yàn)三 痛瀉要方合枳術(shù)丸治療腹瀉型腸易激綜合征重疊功能性消化不良的實(shí)驗(yàn)研究
　　目的:探討痛瀉要方合枳術(shù)丸治療腹瀉型腸易激綜合(D-IBS

8、)重疊功能性消化不良(FD)動(dòng)物模型的機(jī)制。
　　方法:建立腹瀉型腸易激綜合重疊功能性消化不良動(dòng)物模型，設(shè)正常對(duì)照組、模型組、西藥組、中藥低中高劑量組，觀察大鼠行為變化、血漿中血管活性腸肽(VIP)、生長(zhǎng)抑素(SS)、5-羥色胺(5-HT)、內(nèi)毒素(ET)的水平。
　　結(jié)果:痛瀉要方合枳術(shù)丸可顯著改善大鼠腹瀉癥狀、增加糖水消耗百分比;可明顯升高血漿中SS、5-HT含量，降低血漿中VIP含量(P＜0.05，P＜0.01)。