廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌BRCA1突變及其相關(guān)組織病理改變和超聲影像特征的研究.pdf

1、第一部分超聲診斷體系（常規(guī)超聲結(jié)合彈性成像）對乳腺癌的瞻前性研究
　　目的：探討常規(guī)超聲結(jié)合彈性成像（Ultrasound Elastography UE）診斷體系對乳腺癌的診斷價值，提高超聲對乳腺癌的診斷水平。
　　方法：應(yīng)用超聲診斷體系（常規(guī)高頻超聲結(jié)合UE）對乳腺腫塊患者進行檢查，借鑒美國放射學(xué)會(American college of radiology，ACR)的乳腺影像報告和數(shù)據(jù)系統(tǒng)(Breast Imaging

2、 Reporting and Data System，BI-RADS)標準對檢查數(shù)據(jù)進行規(guī)范評分評級，評價其對診斷乳腺癌的診斷價值。研究對象為2010年5月～2011年12月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸腺體外科住院的女性乳腺腫塊患者502例，共567個腫塊。所有患者術(shù)前均未作過任何化療、放療或性激素類藥物等治療，臨床和病理資料完整。超聲檢查采用GE LOGIQ E9彩色超聲診斷儀，探頭頻率6～15 MHz。超聲診斷體系包括常規(guī)超聲:二

3、維超聲(Two Dimensional Ultrasonography,2DUS)、彩色多普勒血流成像(Color Doppler flow imaging，CDFI)、CDFI血流顯示處行脈沖波多普勒(Pulsed wave Doppler，PW)及UE。超聲檢查雙側(cè)乳腺及掃查雙側(cè)腋窩有無腫大淋巴結(jié)，采用CDFI觀察腫塊內(nèi)部及周邊血流分布情況。借鑒BI-RADS評分標準，記錄腫塊的數(shù)目、分布、位置、大小、形態(tài)、縱橫之比、有無邊緣毛刺征

4、、后方回聲衰減、微鈣化、與周圍組織關(guān)系、腋窩腫大淋巴結(jié)及病灶內(nèi)部的血供豐富程度，對超聲征象進行規(guī)范評分，≥3分判為惡性可能性大;然后進入UE模式獲取腫塊硬度特征，根據(jù)羅葆明改良5分法進行彈性評分。術(shù)前根據(jù)超聲診斷體系對乳腺腫塊的進行超聲診斷評級:Ⅰ級:陰性，未發(fā)現(xiàn)異常病灶;Ⅱ級:肯定為良性病變;Ⅲ級:可能為良性病變，3-6個月復(fù)查;Ⅳ級:可疑惡性，需組織活檢;Ⅴ級:高度可能惡性。超聲診斷體系評級≥Ⅳ級為符合惡性腫塊（癌）的診斷，以病理結(jié)

5、果金標準，對超聲診斷體系進行評估。
　　結(jié)果：1.病理結(jié)果診斷為354個良性腫塊，213個惡性腫塊。超聲檢查惡性組與良性組的各項指標（形態(tài)不規(guī)則、邊緣呈分葉或毛刺征、微鈣化、腫塊后方回聲衰減、腫塊內(nèi)血流達Ⅱ～Ⅲ級、RI≥0.70）間均有統(tǒng)計學(xué)差異。2.常規(guī)超聲診斷乳腺癌的敏感性為89.2％，特異性為81.9％，準確性為84.7％。UE診斷乳腺癌的敏感性為85.9％，特異性為89.8％，準確性為88.3％。常規(guī)超聲聯(lián)合UE診斷乳腺癌

6、的敏感性為93.8％，特異性為88.1％，準確性為90.3％。3.常規(guī)超聲聯(lián)合UE的準確性高于常規(guī)超聲，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=369.5，P＜0.001)，同時也高于UE診斷準確性(x2=332.2，P＜0.001)。
　　結(jié)論：常規(guī)超聲與UE聯(lián)合的超聲診斷體系可提高診斷乳腺癌的敏感性和準確性，對鑒別乳腺良惡性腫塊具有較高的應(yīng)用價值。
　　第二部分廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌BRCA1基因突變檢測及分析
　　目的：檢測廣西地

7、區(qū)散發(fā)性乳腺癌患者BRCA1基因的突變情況，探討B(tài)RCA1基因突變與廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌的關(guān)系。
　　方法研究對象為2010年5月至2011年12月在廣西醫(yī)科大學(xué)第一附屬醫(yī)院胃腸腺體外科收治，經(jīng)超聲診斷體系評級≥4的200例女性散發(fā)性乳腺癌患者，發(fā)病中位年齡為47歲（24～81歲）。本組患者術(shù)前均未作過任何化療、放療或性激素類藥物等治療，臨床和病理資料完整，病理診斷均經(jīng)專家教授復(fù)核。實驗組取靜脈血提取基因組DNA，用Primer

8、premier5軟件設(shè)計引物，并借助軟件Oligo7評價引物，然后對BRCA1基因的全部編碼序列及外顯子內(nèi)含子拼接區(qū)進行擴增。擴增產(chǎn)物直接通過DNA序列測序進行突變分析。另取30例健康女性靜脈血作為對照組。
　　結(jié)果：對照組30例健康女性未檢測出BRCA1基因突變。實驗組200例乳腺癌患者中有17例發(fā)生了BRCA1基因突變，突變位于第10外顯子，突變頻率為8.5％。其中，2例為同義突變:1624C＞T、2029T＞C;1例為移碼突

9、變:4200delAAAT;1例為無義突變:3452AGAAACA＞TT;13例為錯義突變:1例1268 C＞T，1例3971G＞A，2例1227 G＞A，1例2309G＞A，4例2238T＞C，4例2798T＞C。此外，BRCA1還發(fā)現(xiàn)了6個單核苷多態(tài)位點:2314C/T(rs1799949，NM007300.3)，2543T/C(rs16940，NM007300.3),2844C/T(rs799917，NM007300.3),334

10、5A/G(rs16941,NM007300.3),3780A/G(rs16942,NM007300.3),6308T/G(rs8176318,NM007300.3)。它們均為已報道的位點，其中4個位點可以引起氨基酸編碼改變。
　　結(jié)論：本研究豐富了廣西地區(qū)散發(fā)性乳腺癌患者BRCA1基因的突變譜，提示了BRCA1基因的突變對于廣西地區(qū)人群中散發(fā)性乳腺癌的發(fā)生也可能有較重要意義。本研究還提示集中對BRCA1基因的第10號外顯子進行突變

11、篩查可提高效率，減少成本，為未來的臨床基因檢測提供篩查模式。
　　第三部分BRCA1基因突變?nèi)橄侔┑南嚓P(guān)組織病理改變及超聲影像學(xué)特征分析
　　目的對第二部分研究中散發(fā)性乳腺癌的17例BRCA1基因突變者的相關(guān)病理組織改變及超聲影像學(xué)特征進行初步研究。
　　方法選取200例散發(fā)性乳腺癌患者中未發(fā)現(xiàn)BRCA1突變的183例乳腺癌患者為對照，與17例BRCA1基因突變?nèi)橄侔┗颊叩南嚓P(guān)病理改變及超聲影像學(xué)特征進行對比分析。病理

12、檢查由病理科醫(yī)生完成。超聲檢查方法同第一部分。
　　結(jié)果1.17例BRCA1突變?nèi)橄侔┗颊卟±眍A(yù)后指標顯示三陰性乳腺癌為35.3％，HER2陰性表達率高達64.7％。2.在超聲影像學(xué)特征方面，實驗組與對照組乳腺癌病例形態(tài)不規(guī)則者分別為12(70.58％)和164(89.62％)，邊緣呈分葉或毛刺征者分別為10(58.82％)和112(61.20％)，微鈣化者分別為7(41.18％)和84(45.90％)，腫塊后方回聲衰減者分別為5

13、(29.41％)和74(40.43％)，腫塊內(nèi)血流達Ⅱ～Ⅲ級者分別為9(52.94％)和130(71.04％)，RI≥0.70者分別為10(58.82％)和124(67.76％)，實驗組超聲體系評級≥4級為11例，占該組病例的64.70％;對照組超聲體系評級≥4級為165例，占該組病例的90.16％，兩組比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=9.54，P=0.002); UE評分＞3分者分別為14(82.35％)和158(86.33％)，差異無統(tǒng)

14、計學(xué)意義，(P＞0.05)。
　　結(jié)論本研究顯示BRCA1基因突變?nèi)橄侔┱吲cHER2陰性表達關(guān)系密切。BRCA1突變?nèi)橄侔┰谛螒B(tài)、邊緣、有無微鈣化、腫塊后方回聲及腫塊內(nèi)部血流等方面的常規(guī)超聲表現(xiàn)較多趨向于良性病灶的聲像學(xué)特征。
　　全文總結(jié)
　　1.常規(guī)超聲與UE聯(lián)合的超聲診斷體系可提高診斷乳腺癌的敏感性和準確性，對鑒別乳腺良惡性腫塊具有較高的應(yīng)用價值。
　　2.對200例散發(fā)性乳腺癌患者的BRCA1基因研究豐富