TNF-α、NF-kB 及氧自由基在大鼠急性酒精性腎損傷中的表達及意義.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:本研究通過大量酒精灌胃的方法建立急性酒精性腎損傷動物模型,探討TNF-α、NF-kB及氧自由基在大鼠急性酒精性腎損傷中的表達及意義。
  方法:酒精性腎損傷動物模型制備:Wistar大鼠(清潔級)隨機分為兩組,模型組給予56%酒精10g/kg/d,分三次灌胃,共5天;對照組給予等量的生理鹽水灌胃。實驗第3、5天末次灌胃后12小時處死動物。心臟采血分離血清,生化檢測血肌酐、尿素氮含量,用硫代巴比妥酸(TBA)法測定血清丙二醛(

2、MDA)的含量,用黃嘌呤氧化酶法測定血清超氧化物歧化酶(SOD)的含量。腎臟病理學檢測:采血后立即取腎組織用10%中性福爾馬林固定,腎組織石蠟切片,常規(guī)HE染色,觀察腎組織病理學改變。免疫組織化學染色:免疫組化染色采用SABC法,測定TNF-α和NF-kB。
  結果:血清學指標:實驗第3天和第5天,模型組與對照組比較血清肌酐值(20.84±3.41IU/L vs15.61±1.84 IU/L、25.61±4.75 IU/L vs

3、17.43±4.11 IU/L,均 P<0.01)和尿素氮值(8.68±0.84 IU/L vs5.34±0.73 IU/L、10.20±1.89 IU/L vs6.92±1.34IU/L,均 P<0.01)有統(tǒng)計學意義;模型組第3天與第5天比較血清肌酐和尿素氮值有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。模型組第3天與第5天血清MDA水平均高于對照組(P<0.01),血清SOD活性相反(P<0.01),MDA含量與SOD活力呈負相關(P<0.01

4、r=-0.639)有統(tǒng)計學意義。病理學檢查:對照組腎小球結構正常,部分腎小管輕度變性考慮取材時缺血缺氧引起;模型組第3天腎小管腫脹明顯,部分上皮細胞脫落,胞漿界限不清,近曲小管管腔閉鎖,可見空泡及核碎裂。模型組第5天腎小管進一步腫脹,腎小管輪廓更不清,腎小管上皮壞死明顯,核消失,可見炎癥細胞浸潤。TNF-α主要在腎小管上皮細胞內呈陽性表達,實驗第3天和第5天,模型組與對照組比較,TNF-α陽性面積百分比(13.14%±2.60 vs1.

5、30%±0.11,P<0.01;31.1%±5.02 vs1.60%±0.31,P<0.01)明顯增高;模型組第5天與第3天比較陽性表達率明顯增高(P<0.01)。NF-kB主要在腎小管上皮細胞內呈陽性表達,實驗第3天和第5天,模型組與對照組比較NF-kB陽性面積百分比(11.97%±2.47vs1.05%±0.21,P<0.01;29.09%±5.09 vs1.24%±0.42,P<0.01)增高明顯;模型組第5天與第3天比較陽性表達

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