廣西BTV感染及傳播媒介調查、病毒分離鑒定與致病性初步研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、藍舌?。╞luetongue,BT)是由藍舌病毒(bluetonguevirus,BTV)引起的出血性疾病,目前已報道27個血清型。BT廣泛分布于溫帶、亞熱帶及熱帶地區(qū),通過嗜血媒介昆蟲吮吸帶毒血液后叮咬易感動物傳播,反芻動物均能感染,羊、牛為本病主要易感動物。
  利用本實驗室采集2009-2015年廣西13市6683份牛羊血清,在檢測出2032份BTV抗體陽性血清樣品中,以C-ELISA方法篩選出500份強陽性血清,與OIE公

2、布的BTV1-24型標準毒株分別進行微量血清中和試驗,發(fā)現廣西畜群中存在BTV-1、2、3、4、5、8、9、11、15、16、17、18、19、20、22、23及24等17個血清型。其中,BTV-5、8、11、13、17、18、19、20、22為國內首次報道。統計分析表明,BTV-1、2和4為廣西流行的優(yōu)勢血清型。此外,本研究還發(fā)現,廣西畜群存在BTV不同血清型的混合感染。
  本研究在南寧市隆安縣、玉林市興業(yè)縣、北海市合浦縣設立

3、三處監(jiān)控點并對監(jiān)控點采集的傳播媒介樣品進行鑒定。共鑒定出7個庫蠓品種,除已報道過的尖喙庫蠓、肩宏庫蠓、荒川庫蠓、異域庫蠓,還新發(fā)現了淡角庫蠓、光胸庫蠓和無害庫蠓。其中尖喙庫蠓、荒川庫蠓、異域庫蠓為已知的BTV傳播媒介。
  對監(jiān)控點采集的2015年10-11月份哨兵動物的100份肝素鈉抗凝血進行病毒分離,以雞胚接種(E)、BHK21細胞傳代(B)、C6/36細胞傳代(A)三種途徑共分離得到23株病毒。通過AC-ELISA及qPCR

4、方法鑒定,其中18株為BTV。通過微量病毒中和試驗及病毒型特異性基因VP2擴增確定分離毒株的血清型。目前已確定5株病毒分屬3個血清型,除一株為羊源BTV-16外,其余4株為牛源毒株,包括BTV-1、BTV-21各一株,BTV-16二株。對上述毒株的VP2、VP7和NS3/NS3A三個基因節(jié)段進行遺傳進化分析,發(fā)現廣西分離株的上述基因大部分屬于BTV東方亞群,與日本、印度株同源性高。但來自羊源BTV-16的VP7節(jié)段卻屬于西方亞群,提示,

5、該毒株的基因組可能發(fā)生分子重配,該片段或許來自外來毒株。
  選取牛源BTV-16型毒株人工感染牛與豬,對其致病性進行初步研究。攻毒8天后,實驗牛僅觀察到鼻黏膜充血,剖檢僅見咽喉黏膜充血,睪丸有出血點等輕微病變,未觀察到舌發(fā)紺,口腔潰瘍,肺充血、水腫等BT典型癥狀;qPCR檢測顯示,外周血液中的病毒含量最高,其次是肺臟和脾臟,病毒的體內分布與早前報道一致。而在40天的試驗周期內,試驗豬各組織器官中均未檢出BTV核酸,表明分離毒株在

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