溫腎益氣顆粒對(duì)慢性阻塞性肺疾病大鼠氣道重構(gòu)及VEGFR-2(KDR)表達(dá)影響的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、研究目的:
　　在建立COPD大鼠氣道重構(gòu)模型的同時(shí)，觀察溫腎益氣顆粒對(duì)COPD大鼠氣道重構(gòu)的干預(yù)作用以及對(duì)大鼠血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子受體2（KDR）表達(dá)的影響。以深入研究名老中醫(yī)經(jīng)驗(yàn)方的作用機(jī)制，力爭(zhēng)開(kāi)發(fā)中藥新制劑。
　　研究方法:
　　1.將50只健康雄性SD大鼠（清潔級(jí)），體重150士20g，隨機(jī)分為5組，即正常對(duì)照組、模型組和溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組。
　　2.采用第1，28天兩次氣道內(nèi)滴入LPS200

2、μg及煙熏10周雙因素刺激法造模。
　　3.溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組在造模第29天開(kāi)始至第70天胃飼溫腎益氣顆粒，劑量分別為2.1g/kg、4.2g/kg、8.4g/kg。
　　4.取右下葉肺組織行HE染色，Masson三色染色，運(yùn)用病理圖像分析軟件，測(cè)量基底膜周長(zhǎng)、氣道管壁總面積、單位面積平均肺泡數(shù)、平均肺泡面積，以及氣道壁膠原的面積。5.采用免疫組化法和逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）檢測(cè)KDR蛋白質(zhì)及KDR

3、 mRNA在肺組織的表達(dá)。
　　6.采用SPSS17.0統(tǒng)計(jì)軟件分析處理數(shù)據(jù)。
　　結(jié)果:
　　1.模型組動(dòng)物體重增長(zhǎng)與正常對(duì)照組比較明顯減少，溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組對(duì)COPD大鼠體重增長(zhǎng)減慢無(wú)明顯作用。
　　2.光鏡下模型組可見(jiàn)細(xì)支氣管上皮細(xì)胞剝脫、變性壞死，杯狀上皮細(xì)胞增生，纖毛粘連倒伏，氣管粘膜下層、肌層出現(xiàn)不同程度的炎癥浸潤(rùn)現(xiàn)象；細(xì)支氣管管壁增厚，肺泡管呈囊狀擴(kuò)張，肺泡間隔斷裂。溫腎益氣顆粒高、

4、中劑量治療組能明顯減輕炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)，且對(duì)小氣道的增厚有明顯抑制作用，但低劑量治療組對(duì)小氣道增厚未見(jiàn)明顯抑制作用，炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)亦未見(jiàn)明顯減輕。溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組與模型組相比單位面積平均肺泡數(shù)明顯增加而平均肺泡面積明顯減小，但仍與正常對(duì)照組有顯著差異，治療組各組間未見(jiàn)明顯差異。
　　3. Masson染色可見(jiàn)模型組各級(jí)支氣管膠原較正常對(duì)照組明顯增厚，溫腎益氣顆粒高劑量治療組可明顯抑制小氣道膠原的增厚，中、低劑量治療組對(duì)支

5、氣管膠原的增厚無(wú)明顯抑制作用。
　　4.免疫組化結(jié)果顯示模型組小氣道KDR蛋白質(zhì)表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組。溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組小氣道KDR蛋白質(zhì)表達(dá)均明顯低于模型組。
　　5.RT-PCR結(jié)果示模型組支氣管肺組織KDR mRNA表達(dá)較正常對(duì)照組顯著增高。與模型組相比溫腎益氣顆粒高、中、低劑量治療組肺組織KDR mRNA的表達(dá)明顯減低。
　　結(jié)論:
　　第一、COPD氣道重構(gòu)大鼠中存在KDR的高表達(dá)，推測(cè)