曲古抑菌素A對膀胱癌BIU-87細胞PTEN和RUNX3基因表達的影響.pdf

1、目的：
　　了解曲古抑菌素A（trichostatinA，TSA）對人膀胱癌BIU-87細胞PTEN(phosphatase and tensin homolog deleted on chromosome ten)基因和Runx3（human runt2related transcription fac2 tor3）表達的影響，并探討曲古抑菌素A作為治療膀胱癌新化療藥的可行性及可能的相關作用機制。
　　方法：
　　取

2、對數(shù)生長期的BIU-87細胞，按照一定的細胞培養(yǎng)方法制成單細胞懸液，用含有不同濃度藥物的培養(yǎng)基作為藥物組，培養(yǎng)一定時間后用噻唑藍（MTT）法檢測膀胱癌BIU-87細胞的存活率，觀察TSA對BIU-87細胞存活率的影響；用半定量RT-PCR法探討抑癌基因PTEN mRNA、RUNX3 mRNA水平改變情況；用Western-blotting法觀察抑癌基因PTEN蛋白、RUNX3蛋白的表達。
　　結果：
　　1.以TSA濃度0

3、nmol/L作為正常組來參照，以濃度為150 nmol/L、300 n mol/L、600 nmol/L、1200 nmol/L的TSA作為處理組，作用于BIU-87細胞分別處理24、48和72 h后，每時間組內部細胞存活率明顯降低，細胞活性具有劑量相關性下降。當TSA濃度為600 nmol/L和1200 nmol/L時，分別處理BIU-87細胞24、48和72 h后，細胞活性呈時間相關性降低（P<0.05，P<0.01）。
　　

4、2.半定量RT-PCR結果，與對照組比較TSA在300 nmol/L～1200 nmol/L作用72 h后使膀胱癌BIU-87細胞PTEN mRNA、RUNX3 mRNA表達升高，且二者都表現(xiàn)出劑量相關性上升（P<0.05，P<0.01）。
　　3. Western-blotting結果，與對照組相比TSA在300 nmol/L～1200 nmol/L處理72h后使膀胱癌BIU-87細胞PTEN蛋白和RUNX3蛋白表達上調，且二者

5、分別具有劑量相關性上升（P<0.05，P<0.01）。
　　結論：
　　1. TSA以150 nmol/L～1200 nmol/L濃度處理時，對BIU-87細胞增殖抑制表現(xiàn)為劑量依賴性；同時TSA濃度為150 nmol/L和1200 nmol/L之間時，其對BIU-87細胞增殖抑制還存在時間依賴性。
　　2. TSA可以誘使膀胱癌BIU-87細胞凋亡且在濃度150 nmol/L和1200 nmol/L之間凋亡率具有劑量