RNA干擾HER2-neu對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：
　　實(shí)驗(yàn)研究靶向HER2/neu基因的siRNA(small interferin RNA)對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞增殖和凋亡的影響。從而為膀胱癌提供新的治療方法打下了理論基礎(chǔ)。
　　方法：
　　(1)化學(xué)合成的靶向HER2/neu基因siRNA在脂質(zhì)體的介導(dǎo)下轉(zhuǎn)染BIU-87細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為HER2/neu siRNA組、空脂質(zhì)體組、陰性siRNA序列組，以未轉(zhuǎn)染BIU-87細(xì)胞為空白對(duì)照組；
　　(2)

2、CCK-8法檢測(cè)沉默HER2/neu基因?qū)Π螂装┘?xì)胞生長(zhǎng)的影響；
　　(3)利用流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞的凋亡；
　　(4)RT-PCR法檢測(cè)轉(zhuǎn)染HER2/neu siRNA對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞HER2/neu mRNA表達(dá)水平的影響
　　(5)Western blot分析轉(zhuǎn)染HER2/neu siRNA對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞HER2/neu蛋白表達(dá)水平的影響
　　結(jié)果：
　　(1)轉(zhuǎn)染HER2/neu s

3、iRNA后BIU-87細(xì)胞的存活率顯著下降，從（82.37±0.90）％降低到（56.76±1.70）%，有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；同時(shí)能誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，siRNA轉(zhuǎn)染組凋亡率達(dá)（45.60±0.70）%，與未轉(zhuǎn)染對(duì)照組（3.87±0.30）%、空脂質(zhì)體組（5.50±0.36）%、陰性序列組（5.33±0.51）%比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.05）；
　　(2)RT-PCR法檢測(cè)BIU-87細(xì)胞株各組HER2/neu基因的表達(dá)情況

4、，發(fā)現(xiàn)轉(zhuǎn)染HER2/neu siRNA72h后的BIU-87細(xì)胞HER2/neu mRNA表達(dá)水平（0.26±0.02）下調(diào),與未轉(zhuǎn)染對(duì)照組（0.73±0.03）、空脂質(zhì)體組（0.71±0.02）、陰性序列組(0.70±0.01)比較有顯著性差異（P<0.05）。未轉(zhuǎn)染對(duì)照組、空脂質(zhì)體組、陰性序列組組間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；Western blot分析結(jié)果顯示，陰性序列組、空脂質(zhì)體組、未轉(zhuǎn)染對(duì)照組蛋白相對(duì)表達(dá)分別為（73.85±

5、0.01）%、（76.86±0.01）%、（77.41±0.02）%。發(fā)現(xiàn)空脂質(zhì)體組及陰性序列組HER2/neu蛋白表達(dá)未受明顯抑制,與未轉(zhuǎn)染對(duì)照組比較無(wú)顯著差異（P>0.05），siRNA轉(zhuǎn)染組蛋白相對(duì)表達(dá)為（49.76±0.01）%，與其余3組比較，HER2/neu蛋白表達(dá)水平明顯下調(diào)（P<0.05）
　　結(jié)論：
　　(1)HER2/neu siRNA轉(zhuǎn)染后,BIU-87細(xì)胞存活率明顯下降,并出現(xiàn)細(xì)胞凋亡,表明siRNA