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文檔簡(jiǎn)介
1、膀胱癌是泌尿系統(tǒng)最常見(jiàn)的惡性腫瘤,術(shù)后高復(fù)發(fā)率為其顯著特點(diǎn)。芹菜素(apigenin)具有多種藥理活性,如降血壓、鎮(zhèn)靜、抗菌以及雌激素樣作用等,近年來(lái)由于發(fā)現(xiàn)其對(duì)多種腫瘤具有抑制作用,從而引起腫瘤學(xué)者的關(guān)注。本研究通過(guò)對(duì)膀胱癌細(xì)胞株BIU-87的體外實(shí)驗(yàn),探討芹菜素對(duì)膀胱癌細(xì)胞的作用效果及其機(jī)制,為保留膀胱患者術(shù)后預(yù)防復(fù)發(fā)及晚期膀胱癌病人的治療探尋一種新的方法。
第一部分芹菜素對(duì)膀胱癌BIU-87細(xì)胞體外增殖的影響
2、 目的:探討芹菜素在體外對(duì)膀胱癌細(xì)胞株BIU-87增殖的影響。
方法:MTT法測(cè)定不同時(shí)間不同濃度芹菜素作用后BIU-87細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制情況。
結(jié)果:MTT法檢測(cè)發(fā)現(xiàn):藥物的抑制作用隨其濃度和時(shí)間的增加而增大,同一時(shí)間不同藥物濃度各組之間以及同一藥物濃度不同時(shí)間之間細(xì)胞抑制率均有顯著差異(P<0.05)。
結(jié)論:芹菜素在體外可明顯抑制膀胱癌BIU-87細(xì)胞增殖,呈明顯的劑量-效應(yīng)、時(shí)間--
3、效應(yīng)關(guān)系。
第二部分芹菜素誘導(dǎo)膀胱細(xì)胞株BIU-87凋亡及機(jī)制
目的:探討芹菜素對(duì)膀胱癌細(xì)胞株BIU-87體外誘導(dǎo)凋亡情況及其可能機(jī)制。
方法:①流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期變化情況;②A(yíng)nnexin V-FITC/PI雙染法流式細(xì)胞術(shù)觀(guān)察芹菜素作用后細(xì)胞的凋亡情況;③RT-PCR檢測(cè)Survivin mRNA表達(dá)的變化;④免疫細(xì)胞化學(xué)SP法檢測(cè)Survivin和Caspase-3蛋白表達(dá)的變化。
4、r> 結(jié)果:①2.03μmol/L芹菜素作用72h后,流式細(xì)胞儀檢測(cè)發(fā)現(xiàn)芹菜素可使BIU-87細(xì)胞阻滯在G2/M期,并出現(xiàn)明顯的凋亡峰。②流式細(xì)胞術(shù)雙染法檢測(cè)細(xì)胞凋亡顯示細(xì)胞凋亡率顯著增加(P<0.05)。③RT-PCR檢測(cè)發(fā)現(xiàn)芹菜素可使BIU-87細(xì)胞Survivin mRNA表達(dá)顯著減少(P<0.05),④免疫細(xì)胞化學(xué)SP法檢測(cè)顯示Survivin蛋白表達(dá)亦顯著減少(P<0.05),Caspase-3蛋白表達(dá)則明顯增加(P<0
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