鴉膽子油乳對(duì)膀胱癌細(xì)胞系BIU-87增殖的影響及其機(jī)制的初步研究.pdf

1、膀胱癌是中國(guó)泌尿生殖系統(tǒng)中發(fā)病率最高的惡性腫瘤,其中大部分是淺表性膀胱癌,目前多采用經(jīng)尿道膀胱腫瘤切除或膀胱部分切除,術(shù)后為預(yù)防復(fù)發(fā)多配合膀胱灌注治療,目前常用的藥物為卡介苗、絲裂霉素C、羥基喜樹堿等.鴉油乳是中國(guó)沈陽藥科大學(xué)自行研制的中藥制劑,自上世紀(jì)七十年代末應(yīng)用臨床治療腫瘤以來,顯示了良好的抗癌效果.對(duì)于膀胱腫瘤,鴉油乳灌注治療具有復(fù)發(fā)率低,副作用小,病人容易耐受等優(yōu)點(diǎn).因此研究鴉油乳的作用機(jī)制對(duì)治療膀胱癌具有十分重要的意義,該課

2、題觀察了不同濃度鴉油乳對(duì)體外培養(yǎng)的膀胱癌細(xì)胞株BIU-87增殖的影響,初步探討其可能的作用機(jī)制,同時(shí)觀察其對(duì)BIU-87細(xì)胞的運(yùn)動(dòng)能力和侵襲力的影響.采用MTT法檢測(cè)不同濃度鴉油乳作用不同時(shí)間對(duì)BIU-87細(xì)胞的抑制作用,進(jìn)行藥物敏感性試驗(yàn),估算鴉油乳對(duì)腫瘤細(xì)胞的半數(shù)抑制濃度IC50;利用PI(碘化丙啶)、Hoechst 33342進(jìn)行染色,熒光顯微鏡觀察,用Annexin V-FITC凋亡檢測(cè)試劑盒經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)不同濃度鴉油乳作用后

3、BIU-87細(xì)胞壞死和凋亡的比例;用Rhodamine 123染色經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)鴉油乳作用早期線粒體膜電位的變化,利用細(xì)胞色素c抗體和OMP25抗體進(jìn)行免疫熒光雙標(biāo)記,激光共聚焦顯微鏡觀察低濃度鴉油乳作用前后細(xì)胞色素c的分布;低濃度鴉油乳作用12h后,RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞procaspase-3 mRNA水平;低濃度鴉油乳作用36h后,用抗procaspase-3及其亞基的多克隆抗體,western blot檢測(cè)caspase-3的活