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1、研究目的:
1:觀察大鼠不同臟器微動(dòng)脈對(duì)去極化和鉀通道阻斷劑的反應(yīng)是否存在組織差異性。
2:觀察大鼠不同臟器微動(dòng)脈對(duì)血栓素A2類似物U46619(0.03、0.1、0.3、1μM)的反應(yīng)是否存在組織差異性,研究U46619收縮大鼠微動(dòng)脈的內(nèi)皮機(jī)制。
研究方法:
1:大鼠微動(dòng)脈環(huán)實(shí)驗(yàn)步驟大鼠斷頭處死、放血,立即取出心臟、腦組織、腎臟、肺臟和小腸并放于4℃的生理平衡液中。在體視顯微鏡的輔助下,急性、顯
2、微分離出大鼠冠狀動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈、腎內(nèi)動(dòng)脈二級(jí)分支、肺內(nèi)動(dòng)脈三級(jí)分支和腸系膜動(dòng)脈,剪取約3mm長(zhǎng)的動(dòng)脈固定于離體微動(dòng)脈張力測(cè)定儀的傳感器上,經(jīng)PowerLabChart記錄上述微動(dòng)脈環(huán)對(duì)收縮劑的反應(yīng)性。計(jì)算鉀通道阻斷劑和U46619的收縮百分率(以60mMKCl收縮達(dá)坪臺(tái)期的幅度為100%),探討大鼠微動(dòng)脈環(huán)間收縮反應(yīng)的組織差異性以及U46619收縮作用的內(nèi)皮機(jī)制。
2:統(tǒng)計(jì)學(xué)分析采用單因素方差分析研究大鼠微動(dòng)脈環(huán)對(duì)收縮劑反應(yīng)
3、的組織差異性,采用t檢驗(yàn)研究U46619收縮作用的內(nèi)皮機(jī)制。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1:大鼠微動(dòng)脈環(huán)的張力隨細(xì)胞外鉀離子濃度梯度增高(20、40、60和80mMKCl)而增加,且40、60、80mMKCl收縮微動(dòng)脈環(huán)的能力具有組織差異性(P<0.01)。其EC50值分別為:冠狀動(dòng)脈(47.0±9.6)mM,大腦中動(dòng)脈(56.2±7.8)mM,腎內(nèi)動(dòng)脈(40.2±0.1)mM,肺內(nèi)動(dòng)脈(40.4±0.5)mM,腸系膜動(dòng)脈(56.
4、4±7.8)mM。
2:四乙胺(10mM)明顯收縮大鼠冠脈、大腦中動(dòng)脈、腎內(nèi)動(dòng)脈,而輕微收縮腸系膜動(dòng)脈和肺內(nèi)動(dòng)脈,其收縮能力具有組織差異性(P<0.01)。四乙胺收縮百分率分別為:冠狀動(dòng)脈(151.6±18.2)%,大腦中動(dòng)脈(114.2±7.8)%,腎內(nèi)動(dòng)脈(65.4±38.4)%,肺內(nèi)動(dòng)脈(1.2±1.0)%,腸系膜動(dòng)脈(0.7±0.2)%。
3:氯化鋇(1mM)均明顯收縮大鼠五種微動(dòng)脈,其收縮能力具有組織差異性
5、(P<0.01)。氯化鋇收縮百分率分別為:冠狀動(dòng)脈(102.7±22.6)%,大腦中動(dòng)脈(71.6±6.7)%,腎內(nèi)動(dòng)脈(36.6±16.6)%,肺內(nèi)動(dòng)脈(46.9±6.0)%,腸系膜動(dòng)脈(12.7±6.8)%。
4:4-氨基吡啶(1mM)顯著收縮大鼠大腦中動(dòng)脈,而輕微收縮腎內(nèi)動(dòng)脈、肺內(nèi)動(dòng)脈、腸系膜動(dòng)脈、冠狀動(dòng)脈,其收縮能力具有組織差異性(P<0.01)。4-氨基吡啶收縮百分率分別為:冠狀動(dòng)脈(3.2±0.4)%,大腦中動(dòng)脈(
6、119.2±19.1)%,肺內(nèi)動(dòng)脈(2.5±1.9)%,腎內(nèi)動(dòng)脈(1.8±2.1)%,腸系膜動(dòng)脈(0.2±0.2)%。
5:格列苯脲(0.01mM)明顯收縮大鼠大腦中動(dòng)脈和冠狀動(dòng)脈,輕微收縮腎內(nèi)動(dòng)脈、肺內(nèi)動(dòng)脈、腸系膜動(dòng)脈,其收縮能力具有組織差異性(P<0.01)。格列苯脲收縮百分率分別為:冠狀動(dòng)脈(36.6±32.2)%,大腦中動(dòng)脈(76.1±27.2)%,腎內(nèi)動(dòng)脈(3.4±5.0)%,肺內(nèi)動(dòng)脈(1.0±0.8)%,腸系膜動(dòng)脈
7、(0.5±0.5)%。
6:U46619濃度依賴性的收縮大鼠不同部位的微動(dòng)脈,0.1μM、1μMU46619收縮微動(dòng)脈環(huán)的能力具有組織差異性(P<0.01);孵育一氧化氮合酶抑制劑L-NAME(0.1mM)增強(qiáng)U46619收縮冠狀動(dòng)脈、大腦中動(dòng)脈、腎內(nèi)動(dòng)脈和肺內(nèi)動(dòng)脈的作用;孵育環(huán)氧合酶抑制劑吲哚美辛(0.01mM)減弱U46619收縮腸系膜動(dòng)脈和腎內(nèi)動(dòng)脈的作用。其EC50值分別為:冠狀動(dòng)脈(3.1±1.1)mM,大腦中動(dòng)脈(4
8、.7±8.1)μM,腎內(nèi)動(dòng)脈(1.7±2.4)μM,肺內(nèi)動(dòng)脈(2.1±1.4)μM,腸系膜動(dòng)脈(0.6±0.7)mM。
實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
1:大鼠不同臟器微動(dòng)脈對(duì)鉀離子通道阻斷劑和細(xì)胞外鉀離子濃度梯度增高(40、60和80mMKCl)的反應(yīng)具有組織差異性。
2:U46619濃度依賴性的收縮大鼠不同臟器的微動(dòng)脈,且0.1μM、1μMU46619收縮五種微動(dòng)脈的能力具有組織差異性,NO和前列腺素類物質(zhì)參與U46619
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