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1、目的:本研究比較不同周齡自發(fā)性高血壓大鼠(spontaneously hypertensive rat,SHR)腎葉間動(dòng)脈縫隙連接功能和表達(dá)差異,探討縫隙連接蛋白在高血壓病腎臟動(dòng)脈血管中的變化。
方法:選擇SHR24只,另選24只Wistar大鼠為對(duì)照組,隨機(jī)分為4、12、48周齡組,每組8只。采用BP-6無(wú)創(chuàng)血壓監(jiān)測(cè)儀測(cè)定大鼠尾動(dòng)脈壓;急性分離不同周齡SHR和Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈,應(yīng)用壓力肌動(dòng)圖技術(shù)觀察非內(nèi)皮依賴性血管
2、收縮劑KCl和PE誘導(dǎo)不同周齡大鼠腎葉間動(dòng)脈的收縮反應(yīng),以及應(yīng)用縫隙連接阻斷劑18β-甘草次酸干預(yù)后,大鼠腎葉間動(dòng)脈收縮反應(yīng)的變化。Western-blot技術(shù)檢測(cè)不同周齡大鼠腎葉間動(dòng)脈縫隙連接蛋白的表達(dá)。
結(jié)果:(1) KCl和PE均可以引起SHR和Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈濃度依賴性的收縮反應(yīng)。SHR組腎葉間動(dòng)脈收縮反應(yīng)均高于相應(yīng)周齡Wistar大鼠組(P<0.05),12周齡SHR收縮反應(yīng)增高最為顯著(P<0.05)。K
3、Cl和PE誘導(dǎo)SHR和Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈收縮反應(yīng)的起始濃度和最大反應(yīng)濃度與4周齡相比12和48周齡時(shí)明顯增大(P<0.05)。
(2)經(jīng)縫隙連接阻斷劑18β-甘草次酸干預(yù)后,各周齡SHR和Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈收縮反應(yīng)均降低(P<0.05)。SHR降低幅度均高于相應(yīng)周齡Wistar大鼠組(P<0.05),12周齡SHR降低幅度更為明顯,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
(3) Western-blot
4、檢測(cè)發(fā)現(xiàn):Cx40:各周齡Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈Cx40表達(dá)無(wú)明顯差異(P>0.05),SHR組隨增齡而減少,4、12周齡SHR比同齡Wistar大鼠表達(dá)增高(P<0.05),48周SHR與Wistar大鼠表達(dá)都減少但SHR降低更為顯著(P<0.05)。Cx45:SHR和Wistar大鼠腎葉間動(dòng)脈Cx45表達(dá)隨增齡均先增高后降低,SHR組較Wistar大鼠組Cx45蛋白表達(dá)增強(qiáng)(P<0.05),12周齡增強(qiáng)更為顯著(P<0.05)。
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