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1、AdissertationsubmittedtoZhejiangAcademyofMedicalSciencesfortheDegreeofMasterArtificialmicroRNAStructureScreeingforHepatocelluarCarcinomaGeneTherapyCandidate:XiaomingHuangMajor:OccupationalandEnvironmentalHealthSupervisor
2、:ZhenyuJiaZhejiangAcademyofMedicalSciencesHangzhou310013PRChinaMay2013目錄中文摘要1ABSTRACT2前言3材料與方法71主要儀器設(shè)備72材料83實(shí)驗(yàn)試劑的配制114方法1441構(gòu)建人工miRNA表達(dá)載體及熒火蟲熒光素酶表達(dá)載體1442用雙熒光素酶活性檢測人工miRNA對螢火蟲熒光素酶基因表達(dá)的沉默效率:1743普通逆轉(zhuǎn)錄PCR(R1’PCR)檢測人工miRNA對螢火
3、蟲熒光素酶基因表達(dá)的沉默效率3044實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測人工miRNA前體和成熟人工miRNA的表達(dá)水平37結(jié)果與分析441構(gòu)建人工miRNA的真核表達(dá)載體及螢火蟲熒光素酶表達(dá)載體442雙熒光素酶活性檢測人工miRNA對螢火蟲熒光素酶基因表達(dá)的沉默效應(yīng)553普通逆轉(zhuǎn)錄PCR(RTPCR)檢測人工miRNA對螢火蟲熒光素酶基因表達(dá)的沉默效應(yīng)。654實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qPCR)檢測人工miRNA前體和成熟人工miRNA的表達(dá)
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