Ad-PUMA用于胰腺癌基因治療的可行性研究.pdf

1、北京協(xié)和醫(yī)學院;中國醫(yī)學科學院博士學位論文Ad-PUMA用于胰腺癌基因治療的可行性研究姓名：裴煒申請學位級別：博士專業(yè)：腫瘤學指導教師：趙平;林晨20090501北京協(xié)和醫(yī)學院中國醫(yī)學科學院博士研究生學位論文胞( M I A P a C a ．2 ，P 3 ，P A N C l ，S W l 9 9 0 ) 中均可高效率表達。將A d ．P U M A 導入細胞后，C C K ．8 法證實P U M A 過表達可抑制胰腺癌細胞增殖，促進

2、凋亡，其促凋亡作用較A d ．p 5 3 強大、快速。通過D N A L a d d e r 法、核D A P I 染色法、流式細胞術(shù)檢測顯示，腺病毒介導的P U M A 基因( A d ．P U M A ) 感染人胰腺癌細胞后可誘導凋亡發(fā)生。R T ．P C R 及W e s t e m b l o t 等方法證實A d ．P U M A 感染M I AP a C a - 2 細胞6 小時后即有表達，可促進C 豁p a S e ．3

3、的活化并誘導P A I 心的剪切。在M I A P a C a 0 2 和P A N C l細胞中證實A d - P U M A 聯(lián)合化療藥( c D D P ，5 F u ，G e m z e r ) 對胰腺癌細胞的增殖抑制作用具有協(xié)同效應，可能是通過誘導細胞內(nèi)P U M A 表達升高而發(fā)揮作用。裸鼠M n P a C a ．2 移植瘤實驗結(jié)果表明瘤內(nèi)注射A d —P U M A 可明顯抑制M i aP a C a - 2 細胞移植瘤

4、的生長，并且與化療藥聯(lián)合應用具有顯著性差異。結(jié)論外源P U M A 導入具有明顯的胰腺癌細胞生長抑制作用，這種作用是通過誘導細胞凋亡介導的，對細胞周期無明顯影響。外源P U M A 導入誘導細胞凋亡可能是通過激活化C a s p a s e 3 并誘導P A R P 剪切失活來誘導腫瘤細胞的凋亡。在胰腺癌細胞系M i a P a C a - 2 和P A N C l 中，小劑量A d ．P U M A 與化療藥( c D D P ，5