草烏標(biāo)準(zhǔn)提取物的研究.pdf

1、草烏為毛茛科植物北烏頭Aconitum kusnezoffii Reichb.的干燥塊根,味辛性溫,有大毒,具有祛風(fēng)濕、止痛的功效,用于風(fēng)寒濕痹,關(guān)節(jié)疼痛,心腹冷痛,麻醉止痛等.草烏應(yīng)用較多,但各地藥材質(zhì)量、炮制方法和質(zhì)控水平不一,使其質(zhì)量差別較大,造成了不少中毒事件.因此,制備"安全、有效、可控"的草烏標(biāo)準(zhǔn)提取物及其制劑十分必要.為此,該文從質(zhì)量控制、提純工藝、烏頭堿(aconitine)的水解動(dòng)力學(xué)、制劑、毒性和藥效等五個(gè)方面對草烏

2、標(biāo)準(zhǔn)提取物進(jìn)行了研究.同時(shí),對不同來源的草烏和川烏(烏頭A.carmichaeli Debx.的塊根)生藥及其標(biāo)準(zhǔn)提取物進(jìn)行了質(zhì)量比較.對草烏中烏頭類生物堿的含量測定方法進(jìn)行了研究.選用容量法或酸性染料比色法測定總生物堿的含量:容量法采用《中國藥典》2000版一部中的硫酸回滴法,將甲基紅指示劑改為甲基紅—溴甲酚綠混合指示劑,使終點(diǎn)顏色變化更為明顯,結(jié)果的重現(xiàn)性良好.酸性染料比色法選擇溴甲酚綠法.兩法對草烏和川烏生藥樣品的測定結(jié)果基本一致

3、,其中以酸性染料比色法的靈敏度較高.采用異羥肟酸鐵比色法測定了酯型總生物堿的含量.建立了準(zhǔn)確、靈敏的HPLC法測定三種雙酯型生物堿[烏頭堿(aconitine)、次烏頭堿(hypaconitine)和新烏頭堿(mesaconitine)]的含量.確定了HPLC指紋圖譜的測定方法.應(yīng)用以上各法對不同來源的草烏及川烏進(jìn)行了測定.結(jié)果表明,生藥的基源植物、產(chǎn)地來源及炮制與否是影響生物堿含量及HPLC指紋圖譜相似程度的重要因素.該文所建立的分析

4、方法及對已有方法的改進(jìn)可供國家藥典委員會(huì)參考.采用正交設(shè)計(jì)等方法對草烏標(biāo)準(zhǔn)提取物的初提、殼聚糖絮凝和大孔樹脂提純等工藝進(jìn)行優(yōu)化,確定了穩(wěn)定可行的工藝路線.應(yīng)用該工藝制得的11批草烏標(biāo)準(zhǔn)提取物中,總生物堿的含量均較高(平均含量達(dá)94.18％),三種雙酯型生物堿的含量及比例穩(wěn)定,且HPLC指紋圖譜的重現(xiàn)性好.此外,還制備了不同來源的草烏及川烏標(biāo)準(zhǔn)提取物.結(jié)果顯示,生藥來源是導(dǎo)致標(biāo)準(zhǔn)提取物生物堿含量差異的主要因素之一.該提純工藝有利于減小總生