貝伐單抗玻璃體腔注射對(duì)大鼠氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變新生血管抑制作用的形態(tài)學(xué)觀察.pdf

1、目的：本課題通過(guò)建立氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(OIR.SD大鼠模型，觀察高氧誘導(dǎo)的新生血管病理改變，并通過(guò)向玻璃體內(nèi)注射貝伐單抗，觀察貝伐單抗對(duì)大鼠視網(wǎng)膜新生血管是否具有抑制作用，及其抑制效果與藥物劑量的關(guān)系。 方法：選擇正常分娩后7天的SD幼鼠120只，體重(12-16g)，隨機(jī)分為8組，每組15只，雌雄兼有。一組作為正常對(duì)照組，剩余7組在(75±2)％的高氧環(huán)境中飼養(yǎng)5天，再回到空氣中飼養(yǎng)7天。幼鼠離開(kāi)高氧環(huán)境的同時(shí)，3個(gè)貝伐單抗給

2、藥組分別給予幼鼠左眼玻璃體腔注射不同劑量的貝伐單抗(1μL，5μL，10μL)，3個(gè)高氧BSS組幼鼠給予左眼單純無(wú)菌BSS液玻璃體腔注射，劑量同貝伐單抗組。高氧組只做高氧處理。在離開(kāi)高氧環(huán)境7天（即鼠齡19天）時(shí)，觀察角膜、晶體透明度，每組中隨機(jī)取3只幼鼠，制作視網(wǎng)膜鋪片，觀察左眼視網(wǎng)膜血管形態(tài)。剩余12只幼鼠摘除左眼眼球，石蠟包埋做病理切片，行HE染色，計(jì)數(shù)突破內(nèi)界膜的視網(wǎng)膜新生血管數(shù)目。 結(jié)果：突破內(nèi)界膜血管內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)@.

3、. HE染色法行突破內(nèi)界膜血管內(nèi)皮細(xì)胞計(jì)數(shù)，高氧照突破內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目(31.32±0.61)，明顯多于正常對(duì)照組幼鼠(1.08±0.38)，兩組結(jié)果經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析差別有顯著性意義(p<0.01)；貝伐單抗注射三劑量組幼鼠突破內(nèi)界膜的新生血管內(nèi)皮細(xì)胞數(shù)目分別為(14.27±1.25)、(9.86±0.93)、(6.58±0.87)，均明顯少于高氧BSS組(31.97±0.26)、(32.08±0.31)、(31.59±0.79

4、)，經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)分析兩兩比較結(jié)果差別有顯著性意義(p<0.01)；貝伐單抗注射組幼鼠兩兩比較均具有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(p<0.01)。視網(wǎng)膜血管形態(tài)觀察，采用Evans藍(lán)灌注血管造影法進(jìn)行視網(wǎng)膜鋪片。正常對(duì)照組視網(wǎng)膜血管自視盤(pán)向四周均勻放射，分支良好，管徑較粗，周邊網(wǎng)膜分支好，結(jié)構(gòu)清晰，未見(jiàn)明顯紊亂彎曲；高氧組、高氧BBS組及貝伐單抗1μL治療組12天時(shí)可見(jiàn)自乳頭發(fā)出新生血管，向周邊走行時(shí)突然收縮、閉塞，形成無(wú)灌注區(qū)，周邊血管密度增加，可見(jiàn)滲漏

5、；貝伐單抗治療5μL，10μL組，血管發(fā)育接近于空氣對(duì)照組，較高氧組及高氧BSS組健康，且隨著劑量的增加，新生血管明顯減少。給藥組小鼠體重與其他組比較，體重變化未見(jiàn)明顯異常。CD34免疫組化顯示高氧對(duì)照組幼鼠視網(wǎng)膜組織切片突破內(nèi)界膜的細(xì)胞為血管源性。 結(jié)論：氧誘導(dǎo)視網(wǎng)膜病變(OIR.SD大鼠模型建立成功。玻璃體腔注射貝伐單抗可抑制新生血管的產(chǎn)生，并且隨著藥物劑量的增加，抑制作用更加明顯。玻璃體腔注射貝伐單抗短期內(nèi)不會(huì)影響幼鼠的生