KiSS-1、MMP-9及Cath-D蛋白在皮膚惡性黑色素瘤中的表達(dá).pdf

1、目的：
　　 皮膚惡性黑色素瘤(cutaneous malignant melanoma,CMM)是由來源于神經(jīng)嵴的黑色素細(xì)胞惡變形成,其發(fā)展迅速,較易發(fā)生血管、淋巴廣泛轉(zhuǎn)移,預(yù)后差,死亡率高。
　　 CMM侵襲轉(zhuǎn)移的發(fā)生涉及多個(gè)基因的調(diào)控,其中包括相關(guān)腫瘤轉(zhuǎn)移基因的激活和/或腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因的失活。腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因指能抑制腫瘤轉(zhuǎn)移形成的基因,KiSS-1基因是其中之一。腫瘤轉(zhuǎn)移發(fā)生過程中另一重要步驟即細(xì)胞外基質(zhì)的降解,

2、基質(zhì)金屬蛋白酶9(Matrix Metalloproteinase-9,MMP-9)和組織蛋白酶D(Cathepsin D,Cath-D)均可水解細(xì)胞外基質(zhì)及基底膜,兩者協(xié)同共同作用,在腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移過程中發(fā)揮重要的作用。KiSS-1還可通過影響MMP-9的轉(zhuǎn)錄活性而抑制腫瘤的侵襲轉(zhuǎn)移。
　　 本實(shí)驗(yàn)采用免疫組織化學(xué)方法對(duì)人類正常皮膚組織、皮膚交界痣組織及CMM組織中KiSS-1,MMP-9及Cath-D蛋白表達(dá)水平進(jìn)行檢測(cè),

3、探討三者在不同組織中的表達(dá)情況及與CMM浸潤(rùn)深度、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系。
　　 方法：
　　 選取2007年-2011年間鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院病理科確診為皮膚惡性黑色素瘤存檔蠟塊42例,交界痣20例。其中CMM患者男性19例,女性23例,年齡在35-79歲之間,平均年齡54歲。按有無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移分為:有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者18例,無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者24例;按腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度Clark分級(jí)法分為:Ⅰ級(jí)(表皮及附屬器上皮)10例,Ⅱ-Ⅲ級(jí)(真

4、皮乳頭層)14例,Ⅳ級(jí)(真皮網(wǎng)狀層)10例,Ⅴ級(jí)(侵及皮下組織)8例;交界痣20例,其中男性9例,女性11例,年齡在9-62歲之間,平均年齡51歲。對(duì)照組為正常皮膚共20例,來自鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院整形外科美容手術(shù)切除的邊角多余正常全厚皮膚。所有研究對(duì)象均有完整的病史資料,且無其他皮膚病、免疫系統(tǒng)疾病等合并疾病,術(shù)前均未行任何治療。運(yùn)用鏈霉素抗生物素蛋白過氧化物酶SP法,探討在CMM組織、皮膚交界痣組織、正常皮肽組織中KiSS-1,MM

5、P-9及Cath-D蛋白的表達(dá)及三者之間的關(guān)系。統(tǒng)計(jì)方法采用SPSS17.0軟件對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)進(jìn)行處理,運(yùn)用卡方檢驗(yàn)和相關(guān)性分析,檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)a=0.05,以P＜0.05為有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,x2分割檢驗(yàn)標(biāo)準(zhǔn)a=0.05/3=0.0167(3為組數(shù))。
　　 結(jié)果：
　　 1.KiSS-1基因的蛋白產(chǎn)物主要表達(dá)于細(xì)胞漿,在CMM中呈低表達(dá)。在CMM中其陽性表達(dá)率為28.57％(12/42),與皮膚交界痣65%(13/20)、正常皮膚7

6、5%(15/20)相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。KiSS-1在CMM中隨腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度的增加表達(dá)減弱(P＜0.05),伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表達(dá)水平低于不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)。
　　 2.MMP-9蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿,在CMM中呈高表達(dá)。在CMM中其陽性表達(dá)率為73.80%(31/42),與皮膚交界痣40%(8/20)、正常皮膚30%(6/20)相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。MMP-9蛋白在CMM中隨腫

7、瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度的增加表達(dá)水平增高(P＜0.05),伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表達(dá)水平顯著高于不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)。
　　 3.Cath-D蛋白主要表達(dá)于細(xì)胞漿,在CMM中呈高表達(dá)。在CMM中其陽性表達(dá)率為80.95%(34/42),與皮膚交界痣45.00%(9/20)、正常皮膚15%(3/20)相比差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。Cath-D蛋白在CMM中隨腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度的增加表達(dá)水平增高(P＜0.05),伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表

8、達(dá)水平顯著高于不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者(P＜0.05)。
　　 4.相關(guān)性分析顯示,KiSS-1與MMP-9表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性P＜0.05),MMP-9與Cath-D表達(dá)呈正相關(guān)性(P＜0.05),KiSS-1與Cath-D表達(dá)無明顯相關(guān)性(P＞0.05)。
　　 結(jié)論：
　　 1.KiSS-1在CMM組織中的表達(dá)明顯較皮膚交界痣及正常皮膚低,KiSS-1在CMM組織中表達(dá)的降低或缺失與CMM腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移密切

9、相關(guān),提示KiSS-1對(duì)CMM的轉(zhuǎn)移有抑制作用,有可能為診斷患者是否出現(xiàn)浸潤(rùn)轉(zhuǎn)移提供參考。
　　 2.MMP-9及Cath-D在CMM組織中的表達(dá)均較皮膚交界痣及正常皮膚高,且隨著CMM組織中腫瘤細(xì)胞浸潤(rùn)深度的增加表達(dá)增高,伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者表達(dá)水平高于不伴淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者。提示兩者的高表達(dá)可能促進(jìn)CMM轉(zhuǎn)移的發(fā)生。
　　 3.在CMM中KiSS-1與MMP-9表達(dá)呈負(fù)相關(guān)性,KiSS-1可通過下調(diào)MMP-9的表達(dá)來發(fā)揮抑制腫瘤