莪術醇誘導胃癌SGC-7901細胞凋亡的實驗研究.pdf

1、目的： 通過檢測莪術醇處理的胃癌SGC-7901細胞增殖的抑制率，細胞的形態(tài)學變化，DNA變化，以及凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達，探討莪術醇對胃癌SGC-7901細胞凋亡的誘導作用，初步闡明莪術醇的抗腫瘤機制，為莪術醇抗腫瘤的臨床應用提供實驗依據(jù)。 研究對象： 胃癌SGC-7901細胞株。 方法： 將莪術醇溶于無水乙醇，初始濃度為5mg/mL。設實驗組A、B、C、D組，按比例濃度配制的12.5、2

2、5、50、100μg/mL莪術醇培養(yǎng)基，并以含1％無水乙醇培養(yǎng)基為陰性對照組E。采用MTT法和alamarblue法檢測12.5-100μg/mL四種不同濃度莪術醇作用SGC-7901細胞24、48、72h后細胞增殖的抑制率；采用AO/EB熒光染色法觀察莪術醇處理SGC-7901細胞24、48、72h后細胞凋亡的形態(tài)學變化；采用PI標記流式細胞術檢測莪術醇處理SGC-7901細胞24、48h的凋亡率；采用WesternBlot檢測莪術醇

3、處理SGC-7901細胞24、48h后凋亡抑制蛋白Bcl-2的表達。 結果： 1、MTT法檢測提示：12.5-100μg/mL莪術醇可以抑制細胞增殖，莪術醇對細胞增殖的抑制作用隨莪術醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的抑制率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增強，加藥組的抑制率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 2、alam

4、arblue法檢測提示：12.5-100μg/mL莪術醇可以抑制細胞增殖，莪術醇對細胞增殖的抑制作用隨莪術醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的抑制率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增強，加藥組抑制率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 3、AO/EB熒光染色法觀察：12.5-100μg/mL莪術醇可以誘導SGC-7901細胞凋亡，莪術醇處理

5、細胞24、48、72h，凋亡細胞數(shù)隨莪術醇濃度增加和作用時間延長(除了12.5μg/mL莪術醇處理SGC-7901細胞24、48、72h，三個時間段的凋亡率之間無顯著性差異(P＞0.05))而逐漸增多，加藥組的凋亡率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 4、流式細胞術顯示：12.5-100μg/mL莪術醇促進SGC-7901細胞凋亡，莪術醇作用SGC-7901細胞24、48h，凋亡率隨莪術醇濃度增加和作用時間延長而逐漸增

6、高，加藥組的凋亡率與對照組比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 5、WesternBlot結果顯示：12.5-100μg/mL莪術醇可以降低SGC-7901細胞Bcl-2蛋白的表達，莪術醇處理SGC-7901細胞24、48h，Bcl-2蛋白表達的相對含量隨莪術醇濃度增加和作用時間延長而逐漸降低，加藥組與對照組Bcl-2蛋白表達的相對含量比較，有顯著性差異(P＜0.05)。 結論： 1、濃度為12.5-100μg/