重組人生長激素對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能恢復(fù)及病理形態(tài)學(xué)改變的影響.pdf

1、缺血性腦血管病的發(fā)病率及致殘率均較高，嚴(yán)重危害人類健康。尋找對腦梗塞有療效的藥物，降低腦血管病的死亡率和致殘率，是目前國內(nèi)外學(xué)者共同關(guān)心的課題。研究發(fā)現(xiàn)，血管生成能促進(jìn)損傷神經(jīng)功能恢復(fù)，與缺血性腦血管病的預(yù)后密切相關(guān)。治療性血管生成(Therapeuticangiogenesis，TAG)，即通過藥物、基因、干細(xì)胞或其他方法促使缺血組織在原有微血管基礎(chǔ)上形成新的毛細(xì)血管，并與原有的血管網(wǎng)相交匯以改善循環(huán)，這一方法的出現(xiàn)為缺血性腦血管病的

2、治療提供了很有希望的新途徑。血管內(nèi)皮生長因子(Vascularendothelialgrowthfactor，VEGF)是目前公認(rèn)促血管生成作用活性最強且必需的生長因子，許多科學(xué)家正致力于尋找一種提高內(nèi)源性VEGF合成及分泌的藥物或方法來治療缺血性腦血管病。 人生長激素(growthhormone，GH)是腦垂體分泌的一種蛋白質(zhì)類激素，由191個氨基酸組成的單鏈多肽，其主要作用是促進(jìn)機體生長，維持肌肉的基質(zhì)和長度，對抗胰島素和合

3、成代謝作用，還可能具有促進(jìn)細(xì)胞存活，抗凋亡，保護心肌的作用。1986年已能用基因工程技術(shù)合成與天然人的GH結(jié)構(gòu)相同的重組人生長激素(recombinanthumangrowthhormone，rhGH)重組人生長激素(rhGH)具有與人體內(nèi)源生長激素同等的作用，具有抗氧化作用；能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖，保護內(nèi)皮細(xì)胞抵抗各種致傷因素的損傷，有效抑制缺氧導(dǎo)致的內(nèi)皮細(xì)胞凋亡；促進(jìn)心肌細(xì)胞和靜脈內(nèi)皮細(xì)胞VEGF的表達(dá)及神經(jīng)保護等多種藥理作用。

4、 本課題將重組人生長激素應(yīng)用于腦缺血大鼠，研究其對腦缺血損傷后神經(jīng)功能恢復(fù)及血管生成、星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的影響，初步探討其促血管生成作用的可能機制以及改善神經(jīng)功能恢復(fù)的可能途徑，豐富腦缺血后治療性血管生成的內(nèi)容，為進(jìn)一步將其開發(fā)成為具有臨床應(yīng)用價值的缺血性腦血管病治療藥物提供一定的理論和實驗依據(jù)。 方法： 采用大腦中動脈線栓法建立大鼠局灶性腦缺血模型。模型制備成功后，將動物隨機分為藥物干預(yù)組和缺血對照組，分別腹腔注射重組人

5、生長激素或等量溶劑，飼養(yǎng)至2天、7天、14天、21天處死。觀察腦組織含水量、梗塞體積。通過免疫組織化學(xué)染色了解微血管密度及星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的情況，采用神經(jīng)功能評分、SEP、MEP等檢測指標(biāo)了解重組人生長激素對缺血后損傷神經(jīng)功能恢復(fù)的影響。 結(jié)果： 成功建立了大鼠大腦中動脈供血區(qū)缺血梗死模型，重組人生長激素干預(yù)組腦組織含水量、梗死體積百分比均明顯低于單純?nèi)毖M。大鼠腦缺血后周邊區(qū)微血管密度增高，7天時最高，21天時略有下降

6、，干預(yù)組在14天時最高，持續(xù)至21天仍在較高的水平；各觀察時相點均較對照組明顯增高，差異有顯著性。大鼠腦缺血后GFAP陽性細(xì)胞數(shù)開始增多，染色加深，突起稍增粗和增多，呈活化的星形膠質(zhì)細(xì)胞形態(tài)。重組人生長激素干預(yù)組在各時相點GFAP陽性細(xì)胞數(shù)較單純?nèi)毖M增加更明顯，染色加深，突起更多更長；GFAP免疫組化灰度值顯著低于缺血對照組，陽性細(xì)胞面積顯著高于缺血對照組。GFAP陽性細(xì)胞面積與MVD呈正相關(guān)。MCAo術(shù)后大鼠神經(jīng)功能明顯受損，自身有

7、一定程度的恢復(fù)。重組人生長激素干預(yù)大鼠，各項檢查指標(biāo)恢復(fù)更快，更明顯，但仍未完全恢復(fù)到正常水平。 結(jié)論： 1.重組人生長激素能明顯減小腦缺血后腦梗塞面積，應(yīng)用神經(jīng)功能缺損量表(NSS)、神經(jīng)電生理檢查證實重組人生長激素干預(yù)能明顯促進(jìn)腦缺血后缺失神經(jīng)功能的恢復(fù)。 2.重組人生長激素具有促進(jìn)細(xì)胞存活，抗凋亡，減輕腦水腫的作用減少了梗死體積，對缺血損傷的神經(jīng)細(xì)胞有保護作用，延長了血運重建的治療時間窗。提示其在血管生成療