意向性運動對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能的影響及其機制研究.pdf

1、目的:
　　通過觀察意向性運動對局灶性腦缺血大鼠神經(jīng)功能及缺血半暗帶ERK-CREB通路表達(dá)及GluR2與PICK1共定位表達(dá)比率的影響，初步探討意向性運動對局灶性腦缺血后神經(jīng)功能的影響及其可能的作用機制。
　　方法:
　　雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠144只，隨機均分為大腦中動脈栓塞模型(MCAO)組、游泳運動(SE)組、飼養(yǎng)環(huán)境改變(EM)組和意向性運動(WM)組，各組又分7d、15d、30d三個亞

2、組。采用線栓法制備MCAO大鼠模型，動態(tài)觀察各組大鼠行為學(xué)變化，TTC染色觀察不同運動方式對15d組大鼠腦梗死體積的影響，RT-PCR及免疫熒光單標(biāo)染色動態(tài)檢測缺血半暗帶腦組織ERK、CREB、GluR2 mRNA及pERK、pCREB蛋白的表達(dá)水平，免疫熒光雙標(biāo)染色檢測15d組GluR2與PICK1的共定位表達(dá)比率。
　　結(jié)果:
　　1.各組大鼠在腦缺血再灌注2h時的神經(jīng)功能評分最高，1d后略下降，第3d略有回升，以后隨時

3、間推移各組評分均呈下降趨勢，各組評分差別無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05)。SE組評分在再灌7d較MCAO組升高(P＜0.05)，而再灌15、30d下降(P＜0.05); EM組及WM組評分在再灌7、15、30d，均較MCAO組下降(P＜0.05)，以WM組下降更明顯。EM組及WM組大鼠的爬梯頻率均呈逐漸增加趨勢，且WM組較EM組顯著增加(P＜0.05)。
　　2.TTC染色結(jié)果顯示:腦缺血再灌注15d時，與MCAO組比較，SE組梗死體

4、積差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05); EM組及WM組腦梗死體積減小(P＜0.05)，以WM組更明顯(P＜0.05)。
　　3.RT-PCR結(jié)果顯示:與MCAO組比較，SE組腦缺血再灌注7d時ERK、CREB mRNA的表達(dá)減少(P＜0.05)，15、30d后的表達(dá)明顯增加(P＜0.05)，而GluR2 mRNA的表達(dá)在7d、15d、30d時均明顯增加(P＜0.05);EM組及WM組各實驗點ERK、CREB、GluR2 mRNA的表

5、達(dá)較MCAO組均增加(P＜0.05)，以WM組更明顯(P＜0.05)。
　　4.免疫熒光單標(biāo)染色結(jié)果顯示:pERK在胞核、胞漿、胞膜均有表達(dá)，pCREB主要表達(dá)于胞核。MCAO組在腦缺血再灌注15d時，pERK、pCREB表達(dá)較7d時上調(diào)，隨后基本保持恒定;SE組、EM組、WM組在再灌注7、15、30d，兩蛋白的表達(dá)隨時間呈上升趨勢;但SE組與MCAO組比較，兩蛋白表達(dá)在再灌7d時減少(P＜0.05)，15、30d明顯增加(P＜0

6、.05);EM組在各時間點兩蛋白的表達(dá)均較MCAO組增多(P＜0.05);WM組兩蛋白的表達(dá)在各時間點均較其他三組明顯增多(P＜0.05)。
　　5.免疫熒光雙標(biāo)結(jié)果顯示:GluR2與PICK1蛋白均表達(dá)于胞漿和胞膜，且兩者的分布情況及變化趨勢存在高度一致性。腦缺血再灌注15d，SE組、EM組及WM組GluR2、PICK1的陽性細(xì)胞數(shù)均較MCAO組明顯增加，而WM組雙標(biāo)陽性細(xì)胞數(shù)較其他三組明顯增加(P＜0.05)
　　結(jié)論: