燒傷大鼠腸粘膜細(xì)胞凋亡變化及重組人生長(zhǎng)激素調(diào)控作用的研究.pdf

1、目的： 本研究在以往我們對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笤缙趹?yīng)用重組人生長(zhǎng)激素（rhGH）實(shí)驗(yàn)及臨床研究的基礎(chǔ)上，仍采用能夠引起腸道損傷及腸源性感染的燒傷后免疫抑制大鼠模型，模擬臨床嚴(yán)重?zé)齻蠡颊咛幱诿庖吖δ艿拖聲r(shí)所發(fā)生的病理生理變化，以觀察嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜細(xì)胞凋亡的變化規(guī)律；早期應(yīng)用rhGH對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜細(xì)胞凋亡的作用，探討其作用機(jī)制以及聯(lián)合應(yīng)用rhGH和美羅培南對(duì)燒傷后大鼠腸源性感染及預(yù)后的作用。 方法： 成年健康雄性W

2、istar大鼠共計(jì)172只，隨機(jī)分為對(duì)照組、燒傷組、rhGH組（簡(jiǎn)稱GH組）、美羅培南組和rhGH+美羅培南組，后四組造成25％總體表面積（TBSA）Ⅲ度燒傷創(chuàng)面，立即腹腔注射地塞米松80mg/kg，腹部皮下注射等滲鹽水（NS）50mL/kg抗休克。GH組于傷后2h開始皮下注射rhGH[長(zhǎng)春金賽藥業(yè)有限公司，1.33IU/（kg·d）]；美羅培南組于傷后2h開始左臀肌肌肉注射美羅培南（日本住友制藥株式會(huì)社）20mg/kg；GH+美羅培南

3、組二者聯(lián)用；燒傷組在相應(yīng)部位注射等量NS連續(xù)3d共4次。 （1）成年健康雄性Wistar大鼠36只，隨機(jī)分為對(duì)照組（6只）和燒傷組（30只），于傷后6h、12h、1d、3d、5d，通過(guò)流式細(xì)胞儀、HE染色和原位末端標(biāo)記法（TUNEL法）、腸粘膜細(xì)胞Caspase-3酶活性測(cè)定檢測(cè)嚴(yán)重?zé)齻笫竽c粘膜細(xì)胞凋亡的變化規(guī)律。 （2）成年健康雄性Wistar大鼠42只，對(duì)照組（6只）、燒傷組（18只）和rhGH組（簡(jiǎn)稱GH組，18只）

4、，于傷后12h、1d、3d，通過(guò)HE染色、TUNEL法和腸粘膜細(xì)胞Caspase-3酶活性測(cè)定檢測(cè)嚴(yán)重?zé)齻笫笤缙趹?yīng)用rhGH對(duì)腸粘膜細(xì)胞凋亡的影響。 （3）成年雄性Wistar大鼠94只，隨機(jī)分為對(duì)照組（6只）、燒傷組（22只）、GH組（22只）、美羅培南組（22只）和GH+美羅培南組（22只），于傷后3d、7d和10d，通過(guò)腸系膜淋巴結(jié)（MLN）細(xì)菌學(xué)檢查、HE染色法和7d大鼠體重變化和10d生存率檢測(cè)，觀察聯(lián)合應(yīng)用rhGH和

5、美羅培南對(duì)嚴(yán)重?zé)齻笫竽c源性感染和預(yù)后的影響。 結(jié)果： （1）流式細(xì)胞儀檢測(cè)、HE染色、TUNEL法和腸粘膜細(xì)胞Caspase-3酶活性檢測(cè)顯示：大鼠燒傷后腸粘膜上皮細(xì)胞凋亡數(shù)較對(duì)照組升高，于1d達(dá)到高峰，以后逐漸下降，但均明顯高于對(duì)照組（P<0.01）。 （2）燒傷組腸粘膜形態(tài)結(jié)構(gòu)及上皮細(xì)胞損傷嚴(yán)重，GH組明顯減輕，基本接近對(duì)照組。在傷后各時(shí)相點(diǎn)，燒傷組及GH組腸粘膜上皮細(xì)胞凋亡率均較對(duì)照組顯著增加（P<0.01）

6、，但GH組顯著低于燒傷組（P<0.01），兩組均于傷后24h達(dá)高峰（15.40％±3.21％vs38.80％±6.98％）；燒傷組及GH組Caspase-3酶活性亦明顯高于對(duì)照組（P<0.05），GH組明顯低于燒傷組（P<0.05），亦于傷后24h達(dá)高峰（156.13±4.66U/mgvs214.60±9.29U/mg）。 （3）聯(lián)合應(yīng)用rhGH和美羅培南組MLN未檢出細(xì)菌，未發(fā)現(xiàn)臟器膿腫，體重下降明顯輕于其他組（P<0.05），