重組人生長激素促進急性心肌梗死大鼠缺血心肌血管再生的實驗研究.pdf

1、冠狀動脈高度硬化或阻塞后，機體受到缺血缺氧的刺激，局部促血管生長因子合成增加，刺激內(nèi)皮細胞遷移、分化、增殖，促進缺血組織在原有血管基礎(chǔ)上形成新血管，并相互連接、擴展，圍繞病變血管組成內(nèi)源性血管旁路，生成新的側(cè)支血管，以此增加組織的灌注和氧供，這個過程稱為血管再生。 血管再生是機體對于缺血、缺氧的重要代償反應，但這個自發(fā)性的生理應答反應通常是不夠的。隨著對血管再生認識的不斷深入，人們提出了“治療性血管再生”(therapeutic

2、angiogenesis)的概念，即：將外源性促血管再生因子引入組織中增強缺血區(qū)域的血管再生，促進側(cè)支循環(huán)，以此達到改善組織缺血缺氧的目的。 生長激素(growthhormone，GH)是一種由腺垂體分泌并且在機體的生長、發(fā)育和代謝中發(fā)揮著重要作用的激素。GH具有心肌保護作用，其機制還不完全清楚。研究發(fā)現(xiàn)GH與血管再生密切相關(guān)。本實驗擬探討rhGH對急性心肌梗死(acutemyocardialinfarction，AMI)大鼠缺

3、血心肌血管再生的影響及其可能的機制。 我們采用結(jié)扎大鼠左前降支的方法制備急性心肌梗死大鼠模型，術(shù)后24小時存活大鼠隨機分為單純心肌梗死組(MI組)，GH1組：術(shù)后24小時開始皮下注射rhGH0.2mg·kg-1·d-1，GH2組：術(shù)后24h開始皮下注射rhGH1.0mg·kg-1·d-1，另設(shè)假手術(shù)組(SO組)為對照組，連續(xù)處理28天后，1.利用Ⅷ因子免疫組織化學染色測定rhGH對AMI大鼠缺血心肌微血管密度的影響；2.透射電鏡

4、下觀察各組大鼠缺血心肌超微結(jié)構(gòu)，TTC染色觀察各組梗死面積，多普勒心臟彩超觀察各組心功能；3.RT-PCR及Westernblot檢測和AMI大鼠缺血心肌促血管再生相關(guān)的指標：VEGF、bFGF及IGF-ⅠmRNA表達和蛋白合成； 結(jié)果： 1.觀察各組大鼠缺血心肌微血管密度的變化，發(fā)現(xiàn)心肌梗死后，大鼠缺血心肌微血管密度顯著增加；rhGH可以進一步促進AMI大鼠缺血心肌血管再生，增加AMI大鼠缺血心肌微血管密度(19.8±

5、2.9vs.11.2±2.79，P＜0.05，28.5±3.6vs.11.2±2.79，P＜0.01)。GH2組較GH1組效果更加明顯(28.5±3.6vs.19.8±2.9，P＜0.01)。 2.透射電鏡下觀察各組大鼠缺血心肌心肌細胞的超微結(jié)構(gòu)，結(jié)果發(fā)現(xiàn)：與MI組大鼠相比，GH1組大鼠缺血心肌心肌細胞超微結(jié)構(gòu)有所改善，GH2組則有明顯好轉(zhuǎn)。 3.TTC染色發(fā)現(xiàn)與MI組相比，GH1組與MI組相比心肌梗死面積有減小的趨勢，

6、但無統(tǒng)計學差異，GH2組心肌梗死面積顯著減小(24.83±6.05vs.32.89±5.13，P＜0.01)。 4.超聲心動圖測定各組心臟功能，結(jié)果提示GH2組AMI大鼠心臟功能顯著改善，而且未發(fā)現(xiàn)明顯的左室肥厚。GH1組AMI大鼠心功能改善不明顯。 5.RT-PCR和蛋白免疫印跡方法觀察各組大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF-ⅠmRNA表達和蛋白合成的變化發(fā)現(xiàn)：發(fā)現(xiàn)心肌梗死后，大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF

7、-ⅠmRNA表達及蛋白合成明顯增加；rhGH可以進一步促進AMI大鼠缺血心肌VEGF、bFGF、IGF-ImRNA表達及蛋白合成，GH2組較GH1組作用明顯。 綜上所述，本實驗的主要結(jié)論如下： 1.急性心肌梗死發(fā)生后，機體可以通過增加缺血心肌促血管再生因子VEGF、bFGF、IGF-ImRNA表達和蛋白合成來增加局部心肌微血管密度，部分代償心肌缺血缺氧 2.rhGH可以促進AMI大鼠缺血心肌血管再生 3.