人羊膜勻漿上清液的體外抗菌特性研究.pdf

1、第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文人羊膜勻漿上清液的體外抗菌特性研究姓名：王欣申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：眼科學(xué)指導(dǎo)教師：謝漢平20090501第三軍醫(yī)大學(xué)碩士學(xué)位論文2制備新鮮HAHS，BCA法測(cè)定蛋白含量，以經(jīng)鑒定培養(yǎng)的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌株、4個(gè)臨床分離敏感菌株、4個(gè)臨床分離多重耐藥菌株以及3個(gè)臨床分離真菌菌株為測(cè)試菌，采用瓊脂糖擴(kuò)散法測(cè)定新鮮HAHS的抗菌譜。3以金黃色葡萄球菌ATCC25923和大腸桿菌ATCC25922作為測(cè)試菌，采用微量肉湯稀釋法

2、和菌落計(jì)數(shù)法分別測(cè)定新鮮HAHS對(duì)上述2種待測(cè)菌的最小抑菌濃度MIC(1niIlimalillllibito珂concen昀tion)和最小殺菌濃度MBC(minimalbact積cidalconcell仃ation)，與眼科臨床常用的10種抗生素比較抗菌作用強(qiáng)弱。4以金黃色葡萄球菌ATCC25923為測(cè)試菌，通過(guò)比較等量的待測(cè)菌液，與不同水平影響因素作用后的等量的HAHS，反應(yīng)1h后吸光度值D(600)下降的幅度大小【△D(600)】

3、，研究溫度、pH值及保存時(shí)間對(duì)HAHS抗菌活性的影響。5制作電鏡標(biāo)本，透射電鏡下觀察HAHS抗菌作用的可能靶點(diǎn)。結(jié)果：1、“去上皮“羊膜以兩種方向貼附于培養(yǎng)基均無(wú)抑菌環(huán)產(chǎn)生，邊緣有菌落長(zhǎng)入覆蓋羊膜，HE染色切片證實(shí)羊膜上皮細(xì)胞刮除完全；而新鮮人羊膜以兩種方向貼附均有明顯的抑菌環(huán)出現(xiàn)，HE染色證實(shí)其單層立方上皮細(xì)胞完整。2、HAHS對(duì)本實(shí)驗(yàn)選用的3個(gè)標(biāo)準(zhǔn)菌株，4個(gè)臨床分離敏感菌株，3個(gè)臨床分離真菌菌株及糞腸球菌臨床多重耐藥株共11種菌株均

4、有明顯抑菌作用，抑菌環(huán)明顯。而對(duì)陰溝桿菌、大腸桿菌和MRSA的臨床多重耐藥菌株均無(wú)明顯的抑菌作用。3、以物質(zhì)的量濃度計(jì)，金葡菌ATCC25923組：HAHS的MIC值明顯小于氯霉素，與克林霉素相當(dāng)，大于青霉素、利福平和左氧氟沙星，MBC值不大于5種中任何一種抗生素；大腸桿菌ATCC25922組：HAHS的MIC值小于磺胺醋酰鈉和頭孢呋辛鈉，與妥布霉素相當(dāng)，大于慶大霉素和諾氟沙星，MBC值也不大于5種中任何一種抗生素。4、以金葡菌ATCC

5、25923為測(cè)試菌，在5O，6O，70，80和9O五個(gè)不同pH值條件下，HAHS都具有良好的抗菌作用，各組間抗菌活性未見(jiàn)顯著差異；經(jīng)20℃，4℃，20℃，37℃及60℃五個(gè)不同溫度處理后的新鮮HAHS也保持了良好的抗菌作用，各組的抗菌活性無(wú)顯著差異，而經(jīng)過(guò)80℃處理的新鮮HAHS的抗菌活性較其它各個(gè)溫度有明顯的降低(△D(600)=o00152，P005)，但仍表現(xiàn)出～定的抗菌作用；我們還分別觀察了在4℃和20℃下將新鮮HAHS保存1d