杏花雨注射液的體外抗腫瘤作用及作用機(jī)制研究.pdf

1、河北醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文杏花雨注射液的體外抗腫瘤作用及作用機(jī)制研究姓名：彭悅穎申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：藥理學(xué)指導(dǎo)教師：張永健20090301中文摘要法測定含藥血清對人乳腺癌細(xì)胞MCF7／S生長的影響：MCF7／S細(xì)胞分為ADM對照組、含藥血清組、正常大鼠血清對照組，每組設(shè)6個平行復(fù)孔，分別加入ADM41tg／ml、5％的含藥血清、10％的含藥血清、15％的含藥血清、正常的SD大鼠血清。3d后，用Fluostar在檢測波長570nm條件下

2、測定OD值，計算藥物對細(xì)胞的抑制率。(4)杏花雨注射液逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞耐藥的研究：MTT法檢測杏花雨注射液的細(xì)胞藥敏性和耐藥倍數(shù)，確定生長率95％的藥物濃度為非細(xì)胞毒性濃度，生長率85‰90％的藥物濃度為低細(xì)胞毒性濃度。同時計算IC50。耐藥倍數(shù)=耐藥細(xì)胞的IC50／敏感細(xì)胞的IC50。MTT法檢測細(xì)胞藥敏性和耐藥性的逆轉(zhuǎn)：實(shí)驗(yàn)分四組：①不同濃度的ADM單獨(dú)作用于敏感細(xì)胞；②不同濃度的ADM單獨(dú)作用于耐藥細(xì)胞；③不同濃度的ADM與非細(xì)胞毒性

3、濃度的杏花雨注射液作用于耐藥細(xì)胞；④不同濃度的ADM與低細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液作用于耐藥細(xì)胞。同前方法測定各孔OD值，計算各組IC50，求出各組耐藥細(xì)胞的逆轉(zhuǎn)倍數(shù)。激光共聚焦顯微鏡觀察：對數(shù)生長期細(xì)胞接種于24孔板，每孔lml。次日，給藥組分別加入非細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液ADM和低細(xì)胞毒性濃度的杏花雨注射液ADM，對照組加入RPMIl640培養(yǎng)液ADM。24h后棄上清，PBS洗一次，激光共聚焦顯微鏡下觀察并定量。(5)杏花雨注射