納米載藥微粒對糞腸球菌的體外抗菌研究.pdf

1、目的:
　　 比較紅霉素納米羥基磷灰石緩釋微球（nHA-PHBV-PEG-EM）、紅霉素納米脂質(zhì)體(EMNP)和氫氧化鈣(Ca(OH)2)在體外對糞腸球菌的抑菌殺菌作用，分析其優(yōu)缺點，為臨床推廣使用納米載藥微粒作為根管消毒劑提供實驗依據(jù)。
　　 方法:
　　 1.利用溶劑蒸發(fā)法制備nHA-PHBV-PEG-EM，采用乙醇注入-硫酸銨梯度-電機攪拌法制備EMNP，完成后檢測納米載藥微粒的形態(tài)、粒徑、載藥量及包封率，

2、并研究其體外釋藥特性。
　　 2.稱量一定量成品Ca(OH)2粉劑，加入腦心浸液培養(yǎng)基(BHI)攪拌均勻，制備成氫氧化鈣懸濁液。
　　 3.采用液體稀釋法進行藥敏實驗，37℃厭氧培養(yǎng)糞腸球菌24小時后，肉眼觀測nHA-PHBV-PEG-EM、EMNP和Ca(OH)2在體外對糞腸球菌的最小抑菌濃度(MIC)和最小殺菌濃度(MBC)，并用MTT輔助確定MIC。
　　 4.運用液體擴散法比較不同濃度nHA-PHBV-P

3、EG-EM、EMNP和Ca(OH)2在體外肉眼觀察下對糞腸球菌抑菌圈的大小，評估納米載藥微粒的抗菌效果。
　　 5.制備2.0mg/ml nHA-PHBV-PEG-EM、2.5mg/ml EMNP和3.5mg/ml Ca(OH)2各2ml，加入0.1ml菌液后放入37℃厭氧培養(yǎng)箱內(nèi)，分別在1天，2天，3天，4天，5天，6天時用滅菌移液槍從試管中取0.1ml液體移植于腦心浸液瓊脂培養(yǎng)基(BHIA)上，平行各做三皿，作厭氧培養(yǎng)24h

4、后，記錄所得平板菌落數(shù)，用統(tǒng)計軟件分析處理。
　　 結(jié)果:
　　 1.nHA-PHBV-PEG-EM粒徑分布較均勻，平均粒徑控制在106.6nm，載藥量為8.34％，包封率達85.84％，體外釋藥持續(xù)穩(wěn)定。
　　 2.EMNP粒徑分布較均勻，平均粒徑控制在102.7nm，包封率為82.40％，載藥量達8.22％，體外釋藥持續(xù)穩(wěn)定。
　　 3.液體稀釋法MIC和MBC實驗結(jié)果:nHA-PHBV-PEG-EM

5、的MIC為2.5 mg/ml，MBC為3.0mg/ml; EMNP的MIC為3.0mg/ml，MBC為3.5mg/ml;Ca(OH)2的MIC為4.0mg/ml，MBC為4.5mg/ml。加入MTT后測得的MIC與液體稀釋法所得的MIC相同。
　　 4.液體擴散法實驗結(jié)果:濃度在2.0mg/ml以上的nHA-PHBV-PEG-EM組和EMNP組，及濃度在3.0mg/ml以上的Ca(OH)2組對糞腸球菌的生長均有抑制作用。nHA-

6、PHBV-PEG-EM組與EMNP組比較，其差異性不具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＞0.05);nHA-PHBV-PEG-EM組與Ca(OH)2組以及EMNP組與Ca(OH)2組，其組間差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 5.用藥時間對抑菌效果的影響:2.0mg/ml nHA-PHBV-PEG-EM的抑菌作用隨時間延長而增強，第5天以后抑菌作用趨于穩(wěn)定;2.5mg/ml EMNP的抑菌作用隨時間變化而增強，具有較佳的緩釋效果;3.5