不同水稻品種DEHY基因的轉(zhuǎn)化研究及后代分析.pdf

1、ClassifiedIndex：Q9432UDc：580SecrecyRate：PublicizedUniversityCode：10082HebeiUniversityofScienceandTechnologyDissertationfortheMasterDegreeTransformationofDEHYgeneindifferentricevarietiesandAnalysisofoffspringIp“一一Candidat

2、e：Supervisor：AssociateSupervisor：AcademicDegreeAppliedfor：Speciality：Employer：DateofOralExaraination：YanSuhongProfWeiJingfangMasterofScienceBotanyCollegeofBiologicalScienceandEngineeringMay，2016摘要摘要水稻作為三大主糧作物之一，占據(jù)著世界主要的土

3、地種植面積，在我國尤其明顯。隨著轉(zhuǎn)基因技術(shù)的出現(xiàn)與發(fā)展，水稻基因組的改造受到廣泛重視，轉(zhuǎn)基因技術(shù)被應(yīng)用到高產(chǎn)、優(yōu)質(zhì)水稻的培育以及提高水稻抗旱、耐鹽、抗蟲和抗除草劑等方面。目前，水稻己成為轉(zhuǎn)基因研究的一種模式作物。但是水稻種類繁多，在組織培養(yǎng)過程中，不同品種的組織培養(yǎng)特性以及植株再生能力存在較大差異；在基因工程改造過程中，不同品種轉(zhuǎn)化效率也顯著不同。本試驗(yàn)擬將6種不同水稻品種——鯤旱1號(hào)、早稻2號(hào)、旱糯2號(hào)、旱糯3號(hào)、吉粳88和綏粳8號(hào)，

4、利用農(nóng)桿菌侵染法將DEHY基因轉(zhuǎn)入其愈傷組織，研究不同水稻品種愈傷組織的表型、狀態(tài)和增殖、再生能力以及轉(zhuǎn)化效率的差異，并對(duì)轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行后代分析；通過除草劑篩選、PCR檢測(cè)和Southern雜交，確定其拷貝數(shù)，選出單拷貝純合體植株，為轉(zhuǎn)基因技術(shù)在水稻育種應(yīng)用中，提供有益參考。試驗(yàn)結(jié)果表明：(1)不同品種的水稻其愈傷組織的誘導(dǎo)率有所不同：旱糯3號(hào)愈傷組織的誘導(dǎo)率最高，達(dá)928％，而鯤旱1號(hào)愈傷組織的誘導(dǎo)率相對(duì)較低，僅816％；(2)不同品

5、種的水稻其愈傷組織的表型和增殖能力區(qū)別較大，綏粳8號(hào)和吉粳88的生長狀態(tài)更好一些；(3)不同品種的水稻分化能力有較大差別，綏粳8號(hào)和吉粳88分化能力相對(duì)較好，均能達(dá)到70％以上，而鯤旱1號(hào)分化能力最差，僅301％；(4)不同品種的水稻轉(zhuǎn)化率有較大差異，最多相差289％，鯤旱1號(hào)轉(zhuǎn)化率最低，僅318％。對(duì)獲得水稻轉(zhuǎn)基因植株后代進(jìn)行分析，Tl代經(jīng)PCR鑒定，得到轉(zhuǎn)基因陽性植株91株；對(duì)T2代轉(zhuǎn)基因植株進(jìn)行除草劑篩選，篩選出45個(gè)疑似轉(zhuǎn)基因純