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文檔簡介
1、目的:建立成年大鼠腎臟缺血再灌注損傷模型。探討Fas,Caspasc-3在成年大鼠腎臟缺血再灌注損傷腎小管上皮細胞凋亡中的作用和機制;探討不同方式缺血后處理對成年大鼠腎臟缺血再灌注損傷的影響;探討兩種劑量氯胺酮后處理對成年大鼠腎臟缺血再灌注損傷的影響。 方法:10周齡同批成年健康雄性Wistar大鼠(200±20克)36只,隨機分6組,每組6只,即假手術(shù)(S)組、缺血再灌注(I/R)組、左下肢缺血后處理(P1)組、腎臟缺血后處理
2、(P2)組、氯胺酮后處理a(K1)組、氯胺酮后處理b(K2)組。S組僅對左腎動脈進行游離,傷口用生理鹽水紗布覆蓋45min:I/R.組采用無創(chuàng)動脈夾夾閉左腎動脈45min后松開,左腎再灌注6h制備I/R模型;P1組在左腎復灌前6min時左股動脈夾閉5min后開放;P2組在左腎缺血45min后灌注10s,停灌10s,反復6次;K1組和K2組在復灌前5min經(jīng)尾靜脈分別給與氯胺酮2㎎/㎏和10㎎/㎏。檢測復灌6h時血清BUN(Cr),Cr(
3、BUN)濃度:光鏡下觀察腎組織病理改變,原位末端脫氧核苷酸轉(zhuǎn)移酶標記(TUNEL)法檢測腎組織中凋亡細胞并計算凋亡指數(shù)(AI);免疫組化法檢測腎組織Fas,Caspase-3表達,電鏡下觀察腎單位超微結(jié)構(gòu)改變。使用SPSS10.0進行統(tǒng)計分析,P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。 結(jié)果:與S組比較,其他5組大鼠血清BUN、Cr濃度升高(P<0.01),腎組織病理改變明顯,腎組織Fas、Caspase-3陽性指數(shù)和凋亡指數(shù)增加(P<0
4、.01);與I/R組比較,其他4組大鼠血清BUN、Cr濃度降低(P<0.01),腎組織Fas、Caspase-3陽性指數(shù)和細胞凋亡指數(shù)減少(P<0.01)。與P1組比較,P2組大鼠血清BUN、Cr濃度降低(P<0.05),腎組織Fas、Caspase-3陽性指數(shù)和細胞凋亡指數(shù)減少(P<0.05)。與K1組比較,K2組大鼠血清BUN、Cr濃度降低(P<0.01),腎組織Fas、Caspase-3陽性指數(shù)和細胞凋亡指數(shù)減少(P<0.01)。
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