缺血后處理對缺血再灌注大鼠腎臟氧自由基的影響.pdf

1、缺血再灌注損傷（ischemia reperfusion injury，IRI）是指組織器官在缺血的基礎上恢復血流灌注后，損傷進一步加重的現(xiàn)象。一般認為缺血再灌注損傷的過程，是由一種可逆性損傷－缺血損傷，轉(zhuǎn)變?yōu)橐环N不可逆性損傷－再灌注損傷的過程。缺血再灌注損傷的機制與細胞內(nèi)鈣超載、大量氧自由基的產(chǎn)生、凋亡基因活化和線粒體功能受損等因素有關(guān)[1]，其中再灌注后爆發(fā)式產(chǎn)生的氧自由基是引起細胞生物分子結(jié)構(gòu)變化和細胞功能損傷的重要原因之一[2]

2、。缺血后處理（ischemic postconditioning，IPO）是近幾年提出的一種減輕缺血再灌注損傷的新方法，是指在組織、器官缺血恢復血供之前，給予的短暫、數(shù)次的再灌注－缺血的處理過程。既往研究表明缺血后處理可對心、腦、肝、腎[3-5]等器官的再灌注損傷產(chǎn)生保護作用，然而其保護作用的機制有待進一步闡明。川芎嗪具有很強的抗氧化作用，在對缺血再灌注損傷的防治中其保護作用已被實驗證實[6]。本研究在大鼠腎臟缺血再灌注損傷及缺血后處理

3、模型的基礎上，通過觀察缺血后處理在不同時間對大鼠缺血再灌注腎臟氧自由基的影響，并通過與川芎嗪的干預效果進行比較，來探討缺血后處理的保護作用及可能機制。
　　目的:
　　建立大鼠腎臟缺血后處理模型，觀察缺血后處理在不同時間對缺血再灌注大鼠腎組織氧自由基的影響，并在再灌注損傷最嚴重時將缺血后處理同川芎嗪治療進行比較，探討缺血后處理對大鼠腎組織氧化損傷的影響及可能機制。
　　方法:
　　1、建立缺血后處理動物模型：結(jié)扎

4、大鼠右側(cè)腎蒂同時阻斷左側(cè)腎動脈45min以造成腎臟的缺血，在再灌注之前進行反復10次的恢復血供20s－阻斷血供20s的處理，以此來完成動物模型的制作。
　　2、72只SD雌性大鼠隨機分為3組，每組24只，即假手術(shù)組（S組），缺血再灌注組（IR組），缺血后處理組（IPO組），各組進一步分成8個時間亞組（0.5h、1h、3h、6h、12h、24h、48h、72h組）。留取各組大鼠血液、腎組織標本，檢測腎功能（BUN、Cr）指標及腎組織

5、氧化損傷（SOD、MDA、CAT、TAC、GSH-PX）指標的變化。
　　3、32只SD雌性大鼠隨機分為4組，每組8只，假手術(shù)組（S組），缺血再灌注組（IR組），川芎嗪治療組（I/R+T組），缺血后處理組（IPO組）,各組動物在術(shù)后24h采取血液、腎組織標本。檢測腎功能（BUN、Cr）及腎組織中氧化損傷（SOD、MDA、CAT、TAC）指標的變化。
　　結(jié)果:
　　缺血后處理組大鼠血清BUN值與缺血再灌注組相比，于再灌

6、注后6h（10.69±4.16vs18.51±1.60mmol/L）、12h（15.77±0.91vs24.69±7.46mmol/L）、24h（8.02±0.61vs30.97±9.96mmol/L）均明顯降低（P<0.05）；血清Cr值較缺血再灌注組于再灌注后6h（51.6±24.6vs93.3±21.3μmol/L）、12h（44.6±3.5vs142.3±66.6μmol/L）、24h（44.0±4.5vs238.3±54.2μ

7、mol/L）均明顯降低（P<0.05）。
　　在再灌注后3h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（90.13±5.17vs82.65±0.92U/mgprot）、CAT值（21.67±0.94vs20.09±0.26U/mgprot）、TAC值（4.05±0.13vs3.54±0.10U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（7.92±0.76vs9.21±0.61nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再

8、灌注后6h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（89.34±2.80vs79.61±0.76U/mgprot）、CAT值（21.63±1.10vs19.31±1.00U/mgprot）、TAC值（3.87±0.14vs3.43±0.08U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.41±0.43vs10.13±0.77nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再灌注后12h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（92

9、.78±2.47vs73.81±0.85U/mgprot）、CAT值（20.57±1.04vs18.12±0.37U/mgprot）、TAC值（3.78±0.14vs3.22±0.04U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.66±0.48vs10.53±0.96nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。在再灌注后24h，缺血后處理組較缺血再灌注組SOD值（90.21±1.83vs72.29±3.28U/mgpr

10、ot）、CAT值（19.64±0.52vs17.79±0.22U/mgprot）、TAC值（3.67±0.23vs3.17±0.17U/mgprot）明顯升高（P<0.05），MDA值（8.96±0.21vs10.71±0.13nmol/mgprot）明顯降低（P<0.05）。缺血后處理組GSH-Px值較缺血再灌注組于再灌注后1h（99.77±1.64vs96.60±1.09U/mgprot）、3h（92.22±5.32vs84.44±

11、1.22U/mgprot）、6h（87.80±6.50vs77.83±2.27U/mgprot）、12h（97.76±4.91vs86.67±1.07U/mgprot）均明顯升高（P<0.05）。
　　在再灌注24h，川芎嗪治療組與缺血后處理組大鼠的BUN、Cr、SOD、MDA、CAT和TAC值均無顯著差異（P>0.05）。
　　結(jié)論:
　　大鼠腎臟缺血再灌注后氧化損傷程度隨再灌注時間延長逐漸加重，且于再灌注后24h損