多西紫杉醇靜脈注射亞微乳的研究.pdf

1、多西紫杉醇(Docetaxel，商品名為Taxotere)是新一代抗腫瘤藥物，它與紫杉醇(Paclitaxel，商品名為Taxol)同屬紫杉烷類，均為FDA批準的紫杉烷類抗癌藥物。其作用機制是通過刺激導(dǎo)管素的聚合，促進微管雙聚體裝配成微管并致使微管超穩(wěn)定而抑制微管網(wǎng)動力學(xué)重組，最終使細胞增殖停止在有絲分裂靜止期(G2/M)的階段。多西紫杉醇新穎的作用機制及其在臨床研究中顯示出的獨特療效，使得多西紫杉醇及其合并用藥方案在臨床上被越來越多的

2、應(yīng)用于乳腺癌、非小細胞肺癌、胰腺癌、軟組織肉瘤、頭頸癌、胃癌、卵巢癌以及前列腺癌等多種腫瘤的治療。 由于多西紫杉醇以t-丁氧羰基取代了紫杉醇中的苯甲酸基團，因而水溶性略大于紫杉醇。盡管多西紫杉醇的水溶性比紫杉醇稍好，但目前上市的多西紫杉醇注射液中仍應(yīng)用Tween80和乙醇作為注射溶媒。市售制劑泰索帝(Taxotere)采用Tween80增溶、乙醇助溶，將其制成一個注射劑濃縮液和一個溶劑的兩瓶裝。其中注射劑濃縮液為含有主藥的Twe

3、en80溶液，溶劑為13％(w/w)的注射乙醇，使用時先將溶劑加入濃縮液中混合均勻，臨用前再用生理鹽水或5％葡萄糖注射液稀釋后使用。這種使用方法操作繁瑣，臨床用藥極不方便，并且在配制過程中容易產(chǎn)生二次污染，給患者的使用帶來風(fēng)險。另外，雖然處方中使用了毒性相對較小的Tween80和乙醇作為溶劑體系，但在臨床應(yīng)用后仍出現(xiàn)了過敏反應(yīng)，盡管發(fā)生率較紫杉醇注射劑低，但使用該藥物時仍然需要對患者進行抗過敏前處理，防止過敏反應(yīng)的發(fā)生。并且，Tween

4、80還可能產(chǎn)生溶血反應(yīng)。為了消除現(xiàn)有多西紫杉醇制劑所產(chǎn)生的一系列問題并解決多西紫杉醇溶解度低的缺點，本課題研制了多西紫杉醇靜脈注射亞微乳，以期為多西紫杉醇的新劑型開發(fā)提供研究基礎(chǔ)。 本課題研究的主要內(nèi)容包括： 1．多西紫杉醇亞微乳的處方前研究。建立了多西紫杉醇亞微乳的HPLC含量測定方法，該方法靈敏、精密、便捷、專屬性強，不僅適用于乳劑中藥物含量的測定，而且可用于多西紫杉醇與其分解產(chǎn)物及其它雜質(zhì)的分離測定。實驗中還考察了

5、各種外界因素對主藥多西紫杉醇穩(wěn)定性的影響。結(jié)果表明，堿性環(huán)境對多西紫杉醇影響最大，高溫、氧化、光照條件次之，而酸性環(huán)境對藥物的影響相對較小。 2．多西紫杉醇亞微乳的處方設(shè)計及制備工藝研究。選取卵磷脂、泊洛沙姆188、油酸及油相的比例進行處方的單因素考察，研究其在不同濃度條件下對亞微乳相關(guān)性質(zhì)的影響，并在此基礎(chǔ)上以穩(wěn)定性參數(shù)為評價指標，通過正交設(shè)計實驗進一步對處方進行優(yōu)化。在進行制備工藝的研究中，分別考察了乳化方法、乳化溫度、乳化

6、時間、均質(zhì)壓力及均質(zhì)次數(shù)對乳化效果的影響，篩選出了最優(yōu)的工藝條件。經(jīng)過處方工藝優(yōu)化后制備的多西紫杉醇亞微乳穩(wěn)定性好，粒徑分布均勻，50％乳滴的粒徑在169nm以內(nèi)。 3．多西紫杉醇亞微乳的穩(wěn)定性研究?？疾炝硕辔髯仙即紒單⑷樵诟邷?、冷凍、光照及低溫條件下的穩(wěn)定性，研究結(jié)果表明：高溫、光照條件會使藥物含量減小，pH值降低；冷凍條件下乳滴的粒徑顯著增大，并發(fā)生分層現(xiàn)象；而在低溫條件下各項指標均無顯著改變。另外，多西紫杉醇亞微乳在不同稀

7、釋液中的物理穩(wěn)定性研究結(jié)果顯示，各稀釋液在5h內(nèi)均未出現(xiàn)粒徑顯著增大的情況，說明該制劑經(jīng)稀釋后不會引起血管栓塞。 4．多西紫杉醇亞微乳的藥效學(xué)研究。采用移植法建立了荷瘤小鼠模型，通過監(jiān)測腫瘤體積的變化、測定平均瘤重及抑瘤率、觀察腫瘤組織的病理切片等方法，對多西紫杉醇亞微乳的抗腫瘤作用進行考察。實驗結(jié)果表明：多西紫杉醇亞微乳治療組荷瘤小鼠的腫瘤組織生長緩慢，瘤體積和重量的增長明顯受到抑制；組織學(xué)觀察結(jié)果也顯示出瘤組織具有生長受抑、

8、壞死明顯等特點。 5．多西紫杉醇亞微乳的體內(nèi)藥代動力學(xué)研究。建立了多西紫杉醇體內(nèi)藥物測定的HPLC法，選取炔諾酮為內(nèi)標，以液-液萃取法處理血漿樣品后進行測定。該法簡單、快捷、靈敏度高，適合多西紫杉醇的體內(nèi)分析研究。多西紫杉醇亞微乳在大鼠體內(nèi)的藥代動力研究結(jié)果顯示，其AUC顯著增加(p<0.05)，清除率CL減小(p<0.05)，表明多西紫杉醇亞微乳在體內(nèi)可保持相對較高的血藥濃度。 6．多西紫杉醇亞微乳的初步安全性評價。通

9、過異常毒性檢查法、血管刺激性試驗以及溶血性試驗對多西紫杉醇亞微乳的安全性進行了初步評價。實驗結(jié)果表明，多西紫杉醇亞微乳無明顯靜脈毒性，對兔耳靜脈血管無明顯不良刺激作用，體外無明顯溶血作用。 7．多西紫杉醇亞微乳的凍干研究。采用冷凍干燥技術(shù)將多西紫杉醇亞微乳制成凍干乳劑。通過考察凍干保護劑的類型、濃度及預(yù)凍的溫度、速度對凍干乳相關(guān)性質(zhì)的影響，對靜脈注射用多西紫杉醇凍干乳的處方及制備工藝進行了初步的研究。研究結(jié)果表明，在考察的五種凍