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1、目的:觀察氟伐他汀和氯沙坦治療對(duì)動(dòng)脈粥樣硬化程度及斑塊炎癥的影響,明確2藥聯(lián)合后,在減輕動(dòng)脈粥樣硬化程度和斑塊炎癥方面是否有協(xié)同作用,為臨床上合理的聯(lián)合用藥提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:將44只雄性新西蘭大白兔按不同處理方式隨機(jī)分為5組:正常對(duì)照組(control group,C組,n=8)、單純高脂組(high-cholesterol group, n=9)、氟伐他汀組(Fluvastatin group,n=9)、氯沙坦組(Losa
2、rtan group,n=9)、氟伐他汀+氯沙坦組(Fluvastatin+Losartan group,n=9)。正常對(duì)照組飼以常規(guī)顆粒飼料;單純高脂組飼以高膽固醇飼料(1﹪膽固醇+5﹪豬油的顆粒飼料);氟伐他汀組飼以高膽固醇飼料+氟伐他汀(10mg/kg/d);氯沙坦組飼以高膽固醇飼料+氯沙坦(25mg/kg/d);氟伐他汀+氯沙坦組飼以高膽固醇飼料+氯沙坦(25mg/kg/d)+氟伐他汀(10mg/kg/d)。飼養(yǎng)4個(gè)月處死,留取
3、胸主動(dòng)脈,分別進(jìn)行胸主動(dòng)脈的HE染色觀察胸主動(dòng)脈的動(dòng)脈粥樣硬化程度,免疫組化染色觀察斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞、MCP-1和平滑肌細(xì)胞的含量變化,并應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)MCP-1基因表達(dá)情況,同時(shí)測(cè)定血清總膽固醇的濃度。 結(jié)果: 1.各組間血脂水平變化:經(jīng)4個(gè)月飼養(yǎng)后,單純高脂組、氯沙坦組及氟伐他汀組的膽固醇水平均明顯高于正常對(duì)照組(P<0.01);各組間兩兩比較發(fā)現(xiàn),氯沙坦組對(duì)血脂無(wú)明顯影響(P>0.05);而氟伐他汀組膽固醇較
4、單純高脂組明顯降低(P<0.01),聯(lián)合使用氟伐他汀和氯沙坦并沒(méi)有進(jìn)一步增加氟伐他汀的降脂作用(P>0.05)。 2.HE染色結(jié)果分析:正常對(duì)照組內(nèi)膜完整,內(nèi)膜、中膜、外膜清晰,無(wú)斑塊形成;單純高脂組的動(dòng)脈內(nèi)膜增厚、凹凸不平,光鏡下觀察可見(jiàn)到大量泡沫細(xì)胞;氯沙坦組與氟伐他汀組動(dòng)脈內(nèi)膜亦有不規(guī)則增厚,凹凸不平,但AS程度較單純高脂組減輕,聯(lián)合使用氟伐他汀和氯沙坦可進(jìn)一步減輕AS的程度。 3.斑塊的免疫組化分析:免疫組化表明
5、,單純高脂組的斑塊內(nèi)可見(jiàn)大量的巨噬細(xì)胞表達(dá),單獨(dú)使用氟伐他汀或氯沙坦均可以減少斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞含量(P<0.01),聯(lián)合使用氟伐他汀和氯沙坦可以使斑塊內(nèi)巨噬細(xì)胞進(jìn)一步減少(P<0.01)。 MCP-1的免疫組化:?jiǎn)渭兏咧M的斑塊內(nèi)可見(jiàn)大量的MCP-1的表達(dá),單獨(dú)使用氟伐他汀或氯沙坦均可以減少斑塊內(nèi)MCP-1的表達(dá)(P<0-01),聯(lián)合使用氟伐他汀和氯沙坦可以使斑塊內(nèi)MCP-1的表達(dá)比單一藥物治療有進(jìn)一步的減少(P<0.05)。
6、 在單純高脂組及各治療組的內(nèi)膜均可見(jiàn)β-actin陽(yáng)性的平滑肌細(xì)胞表達(dá)。 4.血管內(nèi)MCP-1的mRNA表達(dá):RT-PCR結(jié)果表明,在單純高脂組中MCP-1的mRNA表達(dá)明顯高于正常對(duì)照組,單獨(dú)使用氯沙坦或氟伐他汀均可以明顯地減少M(fèi)CP-1的mRNA的表達(dá)(P<0.01),聯(lián)合使用氯沙坦和氟伐他汀治療比單一藥物治療可以進(jìn)一步降低.MCP-1的mRNA的表達(dá)(P<0.05)。 結(jié)論: 1.氟伐他汀和氯沙坦聯(lián)合治
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