兔餌食性高脂血癥及動(dòng)脈粥樣硬化模型的研究.pdf

1、冠心病是嚴(yán)重影響人類健康的心血管疾病，其發(fā)病率和死亡率均居各種疾病前列，現(xiàn)已成為世界上危害人類生命安全的疾病之一。而動(dòng)脈粥樣硬化（atherosclerosis，AS）是冠心病的基本病理基礎(chǔ)。由于AS的發(fā)病機(jī)制仍不明確，因此建立一種脂質(zhì)代謝和斑塊與人類相似的實(shí)驗(yàn)性AS整體動(dòng)物模型具有重要意義。目前，許多學(xué)者廣泛應(yīng)用高脂飲食法建立AS動(dòng)物模型，但Clifton等[1]發(fā)現(xiàn)人體對(duì)高脂飲食的敏感性存在個(gè)體差異。以往的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中亦發(fā)現(xiàn)，應(yīng)用高脂

2、飲食喂養(yǎng)法建立兔AS模型的周期較長(zhǎng)，但尚未明確是否與飲食敏感性相關(guān)。本研究擬以新西蘭大耳白兔為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行高脂血癥和AS模型的研究，明確實(shí)驗(yàn)兔對(duì)高脂飲食是否存在敏感性差異，其血脂水平如何改變，以及高脂飲食對(duì)AS的影響。
　　 目的：探討建立兔餌食性高脂血癥和動(dòng)脈粥樣硬化模型的方法，觀察高脂飲食對(duì)兔體重、死亡率、血脂變化及血管AS情況。
　　 方法：選取健康雄性新西蘭大耳白兔80只，隨機(jī)選取10只飼以普通飼料，另外70只飼

3、以高脂飼料。喂養(yǎng)4wk時(shí)，高脂飼料組家兔死亡22只。第4wk末，耳緣靜脈取血測(cè)血脂水平。48只高脂飼料組家兔中，血清總膽固醇（Cholesterol，TC）低于10mmol·L-1的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物8只作為高脂飲食非敏感組；其余40只家兔的血清TC水平超過(guò)10mmol·L-1，從中隨機(jī)抽取10只作為高脂飲食敏感組；普通飲食組的10只動(dòng)物存活良好，全部納入實(shí)驗(yàn)。分組情況如下：普通飲食組10只、高脂飲食敏感組10只和高脂飲食非敏感組8只。實(shí)驗(yàn)13w

4、k后，以戊巴比妥鈉（25mg·kg-1，iv）麻醉家兔后，頸動(dòng)脈放血處死動(dòng)物，分別分離出主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈、腹主動(dòng)脈、股動(dòng)脈和頸總動(dòng)脈，肉眼觀察病變，并取材做石蠟切片，光鏡下觀察動(dòng)脈管壁組織形態(tài)學(xué)變化。
　　 結(jié)果：
　　 1、高脂飲食對(duì)敏感和非敏感家兔體重的影響
　　 飼以高脂飲食前后，普通飲食組、高脂飲食敏感組和高脂飲食非敏感組之間相比，家兔體重?zé)o顯著差別（P>0.05）。與實(shí)驗(yàn)開(kāi)始時(shí)（0wk時(shí)）的體重相比，

5、三組實(shí)驗(yàn)兔體重均顯著增長(zhǎng)（P<0.05和P<0.01）。
　　 2、高脂飲食對(duì)敏感和非敏感家兔死亡率的影響
　　 普通飲食組和高脂飲食非敏感組動(dòng)物的死亡率在數(shù)值上均低于高脂飲食敏感組，但未見(jiàn)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異（P>0.05）。
　　 3、高脂飲食對(duì)敏感和非敏感家兔血清脂質(zhì)水平的影響
　　 飼以高脂飲食前，普通飲食組、高脂飲食敏感組和高脂飲食非敏感組之間相比，家兔血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平均無(wú)顯著差

6、別（P>0.05）。與普通飲食組相比，高脂飲食敏感組在第4～13wk時(shí)血清TC、TG、HDL-C、LDL-C水平顯著升高（P<0.01），高脂飲食非敏感組在第7～13wk時(shí)，動(dòng)物血清TC、HDL-C、LDL-C水平顯著升高（P<0.01），而高脂飲食非敏感組血清TG水平的改變無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。與高脂飲食敏感組相比，高脂飲食非敏感組家兔血清TC、HDL-C、LDL-C水平的上升程度顯著低于高脂飲食敏感組動(dòng)物（P<0.01），而

7、高脂飲食非敏感組動(dòng)物的血清TG升高程度顯著低于高脂飲食敏感組（P<0.01）。
　　 4、主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈組織病理學(xué)的影響
　　 肉眼觀察普通飲食組家兔主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈血管壁內(nèi)膜為粉白色，表面光滑，動(dòng)脈管壁彈性好。高脂飲食敏感組和高脂飲食非敏感組家兔主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈內(nèi)膜表面粗糙，可見(jiàn)AS斑塊形成，為灰白色，相互融合成片狀，明顯隆起突向管腔，管腔明顯狹窄。
　　 光學(xué)顯微鏡下觀察

8、，普通飲食組家兔主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈均未見(jiàn)AS斑塊形成。在高脂飲食敏感和非敏感組動(dòng)物主動(dòng)脈弓、胸主動(dòng)脈和腹主動(dòng)脈內(nèi)膜粗糙，明顯增厚，內(nèi)含泡沫細(xì)胞，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹、變性，內(nèi)膜及中膜均可見(jiàn)巨噬細(xì)胞和細(xì)胞外脂質(zhì)沉積。
　　 5、股動(dòng)脈和頸總動(dòng)脈組織病理學(xué)的影響
　　 普通飲食組動(dòng)物股動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈內(nèi)膜光滑，管壁彈性良好，無(wú)斑塊及脂質(zhì)斑紋形成；高脂飲食敏感組管壁彈性較差，管壁可見(jiàn)少量AS斑塊；高脂飲食非敏感組內(nèi)膜光滑，管壁

9、彈性稍差，未見(jiàn)明顯AS斑塊。
　　 光學(xué)顯微鏡下觀察，普通飲食組股動(dòng)脈、頸總動(dòng)脈內(nèi)膜表面光滑，內(nèi)皮細(xì)胞排列整齊，中膜平滑肌細(xì)胞（smooth muscle cell，SMC）排列整齊，內(nèi)膜及中膜均未見(jiàn)泡沫細(xì)胞及脂質(zhì)沉積。高脂飲食敏感組和高脂飲食非敏感組股動(dòng)脈僅呈現(xiàn)少量纖維斑塊，未見(jiàn)AS斑塊。
　　 結(jié)論：飼以高脂飲食13wk，建立兔餌食性高脂血癥及AS模型，首次發(fā)現(xiàn)兔對(duì)高脂飲食敏感性存在差異，根據(jù)對(duì)高脂飲食敏感性的差別分

10、為高脂飲食敏感組和高脂飲食非敏感組，高脂飲食非敏感組家兔抗病能力、對(duì)環(huán)境的適應(yīng)能力和耐受性均高于高脂飲食敏感組兔。與高脂飲食敏感組家兔相比，高脂飲食非敏感組家兔對(duì)高脂飲食耐受性強(qiáng)，血清TC、TG、HDL-C和LDL-C增長(zhǎng)程度遠(yuǎn)低于高脂飲食敏感組家兔血清脂質(zhì)的增長(zhǎng)程度。盡管家兔對(duì)高脂飲食的敏感性方面存在差異，但血管均可形成AS斑塊，只是高脂飲食非敏感組家兔AS病變程度明顯輕于高脂飲食敏感組家兔。另外，研究表明，大血管AS斑塊出現(xiàn)較早，病