多粘類芽孢桿菌在茶葉上的定殖及其對(duì)葉際細(xì)菌群落的影響.pdf

1、多粘類芽孢桿菌（Paenibacillus polymyxa）作為植物促生菌，具有微生物農(nóng)藥和微生物菌肥的雙重作用，將其制備成微生物肥料作用于根際已廣泛研究，而且得到良好的效益，然而其作為植物促生菌在葉際上的研究則較少。植物葉際是植物、微生物與環(huán)境相互作用的活躍界面，植物為微生物提供附著位點(diǎn)和營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，微生物則通過復(fù)雜的作用對(duì)植物產(chǎn)生有益或有害的影響。定殖是葉際微生物發(fā)揮作用的先決條件。本文設(shè)計(jì)了大田試驗(yàn)，將甘薯廢水資源化利用制備多粘類

2、芽孢桿菌菌劑并探究菌劑在茶樹葉際上的定殖及其對(duì)葉際微生物的影響。本課題以定性和定量分析相結(jié)合，采用了實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)研究了多粘類芽孢桿菌在茶樹葉際的定殖情況，及其對(duì)葉際總細(xì)菌、總真菌及部分病原菌的影響，采用高通量測(cè)序技術(shù)分析了施用菌劑對(duì)葉際細(xì)菌群落的影響。獲得主要結(jié)果如下:
　　1)利用甘薯廢水培養(yǎng)的多粘類芽孢桿菌施用在茶樹上，多粘類芽孢桿菌能夠在茶樹葉際定殖，且不同季節(jié)其定殖情況不同。春季多粘類芽孢桿菌定殖周期為21天，即

3、21天后處理組與對(duì)照組數(shù)量無顯著性差別(P＞0.05);秋季多粘類芽孢桿菌的定殖周期至少為89天，即在89天后處理組數(shù)量依舊高于對(duì)照組。
　　2)對(duì)幾種人體細(xì)菌性病原菌進(jìn)行實(shí)時(shí)熒光定量PCR分析，結(jié)果顯示多粘類芽孢桿菌對(duì)常見的細(xì)菌性病原菌如銅綠假單胞桿菌（Pseudomonas aeruginosa）、蠟樣芽胞桿菌(Bacillus cereus)和分枝桿菌（Mycobacterium spp.）影響不顯著(P＞0.05)。

4、>　　3)通過對(duì)春季和秋季部分茶葉樣品進(jìn)行16SrRNA基因高通量測(cè)序，結(jié)果顯示茶樹葉際細(xì)菌優(yōu)勢(shì)類群為變形菌門（Proteobacteria）、擬桿菌門（Bacteroidetes）和放線菌門(Actinobacteria)。不同季節(jié)其優(yōu)勢(shì)菌屬有所差異，春季樣品中unclassified菌群占優(yōu)勢(shì)，緊隨其后的是甲基桿菌屬（Methylobacterium）、金黃桿菌屬（Chryseobacterium）和鞘氨醇單胞菌屬（Sphingom

5、onas）;秋季樣品中甲基桿菌屬（Methylobacterium）、鞘氨醇單胞菌屬（Sphingomonas）、Aureimonas和泛菌屬（Pantoea）占主要地位。
　　4)多粘類芽孢桿菌的施用第一天后能夠引起部分菌群數(shù)量的增加，如厚壁菌門（Firmicutes）和綠彎菌門（Chloroflexi），但這種增加在施菌后第三天就降至對(duì)照水平。
　　5)茶葉樣品葉際細(xì)菌群落α-多樣性和β-多樣性的結(jié)果表明，季節(jié)性的變化對(duì)