小麥全蝕病生防細(xì)菌的篩選鑒定及其在小麥根際定殖的研究.pdf

1、小麥全蝕病是由禾頂囊殼小麥變種（Gaeumannomyces graminis var.tritici）引起的真菌病害，在世界上許多小麥產(chǎn)區(qū)都有發(fā)生，為典型的小麥根部病害。小麥全蝕病首先在中國浙江省發(fā)現(xiàn)，隨后在我國多個小麥產(chǎn)區(qū)發(fā)生，目前病害發(fā)生仍呈加重趨勢。
　　為篩選對小麥全蝕病有控制作用的生防菌，本研究從河南商丘全蝕病發(fā)生田塊的小麥根際土，利用稀釋分離法共獲得648株細(xì)菌，通過平板生防測定初篩出對小麥全蝕病菌具有生防作用的細(xì)菌

2、41株，再從中篩選出抑菌帶大于0.3 cm或雖然抑菌帶小于0.3 cm但長勢強的細(xì)菌20株。根據(jù)20株細(xì)菌的16S rDNA和rpoB基因的序列對這些菌株進行了分子鑒定，并對這些菌株在溫室盆缽試驗中的防效進行了測定。進一步挑選出9株代表性細(xì)菌菌株(GP4，GP9，GP16，GP46，GP51，GP52，GP54，GP56,GP59)進行下一步研究。
　　根據(jù)16S rDNA和rpoB的BLAST結(jié)果以及生理生化分析的結(jié)果表明這9株

3、細(xì)菌均為假單胞菌。其中GP4，GP9，GP16，GP46，GP59為Pseudomonas poae，GP51和GP52為Pseudomonas chlororaphis，GP54和GP56為Pseudomonas putida。生理生化試驗結(jié)果表明:9個菌株都產(chǎn)生蛋白酶;GP51、GP52、GP54和GP56可以產(chǎn)生嗜鐵素;所有菌株均不產(chǎn)生幾丁質(zhì)酶。對9株細(xì)菌進行了生防物質(zhì)產(chǎn)生相關(guān)基因的檢測，這些菌株基因組中都不舍2，4-二乙?；g苯

4、三酚和藤黃綠膿菌素產(chǎn)生相關(guān)基因;只有GP51，GP52含有吩嗪-1-羧酸和硝吡咯菌素產(chǎn)生相關(guān)基因。溫室防效試驗結(jié)果表明9株生防細(xì)菌對全蝕病都有一定的生防效果，其中GP51，GP52的效果最好，防效分別達(dá)到30.5％和33.3％。
　　在明確9株生防菌對小麥全蝕病具有較好防治效果的基礎(chǔ)上，進一步用平板生防試驗測定了它們對其他一些小麥根部病害病原菌的抑制作用。結(jié)果表明9株細(xì)菌對小麥根腐病菌的抑制效果普遍較好，抑菌帶寬度均在3.5 mm

5、以上，只有GP51、GP52菌株對禾谷絲核菌有一定的抑制效果，對小麥赤霉病菌有抑制作用的菌株有GP9、GP16、GP46、GP51和GP59，但抑菌效果較差，這些生防菌對小麥莖基腐病菌不同化學(xué)型菌株的抑制效果存在差異。
　　為了解9個生防菌在小麥根部的定殖情況，通過馴化篩選獲得9株生防菌的利福平抗性菌株，用含菌玉米砂接種的方法分別測定了原始菌株與馴化菌株對小麥全蝕病的防效。這一步測定了6株細(xì)菌（2株P(guān)seudomonas poae

6、 GP9和GP59，2株P(guān)seudomonas putida GP54和GP56以及2株P(guān)seudomonas chlororaphis GP51和GP52）在小麥根部定殖情況，結(jié)果表明這些菌在滅菌的土壤中的定殖量高于自然土的定殖量。其中GP51和GP52在4個處理中的定殖效果均較好，在一定程度上可解釋GP51和GP52的具有較好生防效果的原因。
　　本研究為小麥全蝕病的生物防治提供了重要的菌株材料，為后續(xù)高效生防菌的篩選、田間應(yīng)