MMP-2、MMP-9和TIMP-1在類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎表達(dá)的研究.pdf

1、類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎(RA)是一種以關(guān)節(jié)滑膜炎為特征的慢性全身性自身免疫性疾病，類(lèi)似于“局限性惡性腫瘤”的增生性和破壞性病變，呈進(jìn)行性發(fā)展，晚期由于關(guān)節(jié)軟骨及骨的破壞而導(dǎo)致關(guān)節(jié)畸形和功能障礙。該疾病在我國(guó)的發(fā)病率約為0.34～0.36％。此病迄今發(fā)病機(jī)制未能完全闡明。 近年來(lái)眾多學(xué)者認(rèn)為基質(zhì)金屬蛋白酶(MMPs)與RA發(fā)病之間有著密切聯(lián)系。MMPs是一類(lèi)以Zn<'2+>為輔助因子的蛋白酶家族，在體內(nèi)主要降解細(xì)胞外基質(zhì)(ECM)，是調(diào)節(jié)

2、ECM動(dòng)態(tài)平衡的最重要的一大酶系。MMPs可降解RA的關(guān)節(jié)軟骨與骨中的膠原，蛋白多糖及其他的細(xì)胞外基質(zhì)大分子，促進(jìn)血管翳對(duì)軟骨的侵襲。而RA關(guān)節(jié)的損傷主要來(lái)源于增生的血管翳對(duì)于關(guān)節(jié)軟骨的侵襲。造成累及周身關(guān)節(jié)的增生性和侵蝕性滑膜炎。目前為止已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了二十余種MMP，其中，MMP-2與MMP-9同屬于MMPs家族的明膠酶類(lèi)，它們可以溶解明膠、Ⅰ型、Ⅳ型、Ⅴ型和Ⅸ型膠原以及粘合素，而這些成分也是關(guān)節(jié)軟骨的重要組成成分，故而MmP-2和MMP

3、-9和RA的發(fā)病機(jī)制有關(guān)?；|(zhì)金屬蛋白酶組織抑制劑(TIMPs)是MMP的天然抑制劑，為一組可抑制MMP活性的多功能因子，它們?cè)诙鄠€(gè)環(huán)節(jié)抑制MMP的活性，防止ECM的降解。在RA中，TIMPs為了保持被MMPs打破的ECM的平衡，在表達(dá)水平上亦會(huì)做出變化。TIMPs可分為四類(lèi)，TIMP-1是其中的一種，TIMP-1能抑制絕大多數(shù)的MMP，但主要為MMP-9的特異性抑制劑，其可與MMP-9前體形成高度親和的、非共價(jià)鍵結(jié)合的復(fù)合物。MMP-

4、2、MMP-9和TIMP-1在RA中的表達(dá)有待研究。 目的： 觀察MMP-2、MMP-9和TIMP-1在RA滑膜被覆細(xì)胞以及滑膜下組織中的表達(dá)狀況，探討MMP-2、MMP-9和TIMP-1在RA發(fā)病中的作用機(jī)理。 材料與方法： (1)本研究選取了天津市天津醫(yī)院2004年1月至2006年10月經(jīng)病理學(xué)確診的RA病例手術(shù)切除滑膜標(biāo)本65例作為實(shí)驗(yàn)組：其中女性患者43例，年齡17～70歲，平均年齡37±0.12

5、歲，發(fā)病部位：膝關(guān)節(jié)34例，髖關(guān)節(jié)2例，肘關(guān)節(jié)3例，踝關(guān)節(jié)3例，腕關(guān)節(jié)1例；男性患者22例，年齡12～71歲，平均年齡39±0.10歲，部位：膝關(guān)節(jié)17例，髖關(guān)節(jié)2例，踝關(guān)節(jié)2例，腕關(guān)節(jié)1例。另外選取10例骨性關(guān)節(jié)炎(OA)滑膜和7例大致正?；そM織(半月板損傷三天之內(nèi)手術(shù)標(biāo)本，年齡11～35歲，平均年齡22±0.20歲)作為對(duì)照組。 (2)所有標(biāo)本均經(jīng)10％福爾馬林固定，梯度酒精脫水，二甲苯透明，浸蠟，石蠟包埋后行5μm連續(xù)切

6、片，分別進(jìn)行HE染色，采用兔抗人MMP-2，MMP-9和TIMP-1多克隆抗體進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。 (3)在光學(xué)顯微鏡下進(jìn)行觀察：對(duì)RA組、OA組和大致正?；そMMMP-2、MMP-9以及TIMP-1的陽(yáng)性細(xì)胞判定標(biāo)準(zhǔn)為，每例隨機(jī)選取10個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)每個(gè)視野網(wǎng)格測(cè)微尺內(nèi)陽(yáng)性細(xì)胞個(gè)數(shù)，10個(gè)視野陽(yáng)性細(xì)胞總數(shù)/10得出每例陽(yáng)性細(xì)胞均數(shù)，<10為陰性(-)；11～25為(+)；26～50為(++)：≥51為(+++)。用上述方法

7、，對(duì)RA組中的滑膜被覆細(xì)胞和滑膜下組織中的陽(yáng)性細(xì)胞進(jìn)行計(jì)數(shù)，標(biāo)準(zhǔn)同上。 (4)數(shù)據(jù)處理：采用SPSS11.5統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。MMP-2，MMP-9以及TIMP-1在RA組與OA和大致正?；そM的表達(dá)比較采用兩樣本比較的秩和檢驗(yàn)。MMP-2，MMP-9以及TIMP-1在RA組的滑膜被覆細(xì)胞和滑膜下組織中的表達(dá)采用兩樣本比較的秩和檢驗(yàn)。評(píng)價(jià)MMP-2、MMP-9以及TIMP-1之間的表達(dá)相關(guān)性，采用Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)

8、行檢驗(yàn)。 結(jié)論： (1)RA患者M(jìn)MP-2、MMP-9以及TIMP-1的陽(yáng)性表達(dá)率明顯高于OA組和大致正?；そM。因此推斷MMP-2、WMP-9以及TIMP-1在RA的發(fā)病機(jī)制中發(fā)揮作用。 (2)MMP-2、MMP-9以及TIMP-1在RA滑膜被覆細(xì)胞和滑膜下組織的陽(yáng)性表達(dá)率不同，表明RA的不同組織部位的MMPs和TIMP的表達(dá)有差異。 (3)MMP-9和TIMP-1的陽(yáng)性表達(dá)有顯著相關(guān)性，推斷可能是因?yàn)?/p>