脂肪來源干細(xì)胞移植聯(lián)合跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)對(duì)腦缺血大鼠腦內(nèi)NogoA及其受體表達(dá)的影響.pdf

1、目的：探討脂肪來源干細(xì)胞（ADSCs）移植和跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練對(duì)腦缺血大鼠神經(jīng)功能和腦內(nèi)神經(jīng)軸突再生抑制因子Nogo A及其受體NgR、PirB表達(dá)的影響，為腦損傷的治療提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　方法：1、體外分離培養(yǎng)ADSCs。
　　2、取108只成年SD大鼠隨機(jī)分為五組：假手術(shù)組、模型組、移植組、運(yùn)動(dòng)組、聯(lián)合組，后四組再根據(jù)造模后的時(shí)間點(diǎn)分為：7d，28d兩個(gè)亞組，每組12只。所有大鼠在制備大腦中動(dòng)脈栓塞（MCAO）模型前先進(jìn)行適應(yīng)

2、性運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練3天。
　　3、采用改良Zea-Longa線栓法制備MCAO模型。
　　4、移植組、聯(lián)合組于造模成功后24h經(jīng)側(cè)腦室移植培養(yǎng)的第3-4代ADSCs（1×106）。
　　5、運(yùn)動(dòng)組、聯(lián)合組于造模成功后48h采用電動(dòng)跑臺(tái)訓(xùn)練儀進(jìn)行康復(fù)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練，每天30min，直至預(yù)定時(shí)間點(diǎn)；其余組則置于跑臺(tái)儀上相同的時(shí)間，但不進(jìn)行跑臺(tái)運(yùn)動(dòng)訓(xùn)練。
　　6、采用修正的神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分方法（mNSS）評(píng)價(jià)各組大鼠MCAO模型后4d

3、、7d、14d和28d的神經(jīng)功能恢復(fù)情況。
　　7、MCAO模型7d后通過大鼠腦組織HE染色觀察各組大鼠腦組織的病理改變情況；MCAO模型28d后通過大鼠腦組織TTC染色觀察各組大鼠腦梗死體積情況。
　　8、MCAO模型7d、28d后，采用實(shí)時(shí)定量-多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（re altime-PCR）法、western blot法定量和免疫熒光組織化學(xué)染色法定位檢測(cè)大鼠腦組織缺血周邊區(qū)Nogo A及其受體NgR、PirB的表達(dá)情況。

4、
　　結(jié)果：1、各組大鼠造模后神經(jīng)功能逐漸恢復(fù)，移植組、運(yùn)動(dòng)組大鼠造模后14d、28d神經(jīng)功能評(píng)分優(yōu)于模型組（P<0.05），聯(lián)合組大鼠神經(jīng)功能評(píng)分明顯優(yōu)于模型組（P<0.01或 P<0.05）；造模后7d HE染色結(jié)果顯示模型組大鼠腦組織缺血周邊區(qū)神經(jīng)細(xì)胞數(shù)量減少，細(xì)胞水腫明顯，治療后腦組織損傷明顯減輕；造模后28d腦梗死體積移植組、運(yùn)動(dòng)組、聯(lián)合組與模型組相比明顯減小（P<0.01或P<0.05）。
　　2、realtim

5、e-PCR法和Western blot法結(jié)果顯示：與移植組、運(yùn)動(dòng)組相比，造模后28 d聯(lián)合組大鼠Nogo A、NgR和PirB的表達(dá)明顯降低（P<0.01或P<0.05）。
　　3、免疫熒光組織化學(xué)法結(jié)果顯示：NogoA主要在缺血周邊區(qū)的少突膠質(zhì)細(xì)胞中表達(dá)，神經(jīng)元也有少量表達(dá)；NgR主要在缺血周邊區(qū)的神經(jīng)元胞體中表達(dá)，少量在神經(jīng)軸突中表達(dá)； PirB主要在缺血周邊區(qū)的神經(jīng)軸突中表達(dá)，少量在神經(jīng)胞體中表達(dá)。
　　結(jié)論：脂肪來源