人血漿中阿托伐他汀和主要代謝物的定量分析及生物等效性研究.pdf

1、背景阿托伐他汀是3-羥基-3-甲基戊二酰輔酶A還原酶抑制劑,可顯著降低體內(nèi)膽固醇的合成和儲存,臨床用于高膽固醇血癥的治療。在體內(nèi)的主要代謝物為鄰位羥基阿托伐他汀(o-OAT)和對位羥基阿托伐他汀(p-OAT),兩者可產(chǎn)生70％的藥理活性。
　　 目的建立靈敏、專屬的液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法(LC-MS/MS)同時測定人血漿中的阿托伐他汀、o-ONI、和p-OAT,并應(yīng)用于阿托伐他汀的人體藥代動力學(xué)和制劑生物等效性研究。
　　

2、 方法在冰浴條件下,取500μL血漿樣品加入250μL0.1M醋酸銨(pH=3),以d5-阿托伐他汀和瑞舒伐他汀為內(nèi)標(biāo),經(jīng)乙醚-二氯甲烷(3:2,v/v)液-液萃取后,采用AgilentZorbaxSBC18柱(150×4.6mm,5μm)進(jìn)行分離,以甲醇-5mmol·L-1醋酸銨-甲酸(20:80:0.1,v/v/v)為流動相,采用電噴霧電離(ESI)源正離子模式、多反應(yīng)監(jiān)測(MRM),用于定量分析的離子反應(yīng)分別為m/z559→440

3、(阿托伐他汀),m/z564→445(內(nèi)標(biāo)d5-阿托伐他汀),m/z575→(440,466)(o-OAT),m/z575→(440,466)(p-OAT),m/z482→258(內(nèi)標(biāo)瑞舒伐他汀)。本方法被應(yīng)用于阿托伐他汀人體藥代動力學(xué)和制劑生物等效性研究。24例健康男性受試者隨機(jī)交叉單劑量空腹口服阿托伐他汀受試制劑或參比制劑各20mg,于給藥前和給藥后0～72h不同時間點采集血樣。
　　 結(jié)果測定血漿中阿托伐他汀的線性范圍為0

4、.050～15.0ng·mL-1;o-OAT的線性范圍為0.050～5.00ng·mL-1,p-OAT的線性范圍為0.050～2.50ng·mL-1,三者的定量下限均為0.050ng·mL-1,日內(nèi)、日間精密度(RSD)均小于9.1%,準(zhǔn)確度(RE)在-3.6%～5.1%之間。受試制劑與參比制劑的阿托伐他汀和o-OAT的AUCo-t幾何均值比的90%置信區(qū)間均在80%～125%之間,Cmax幾何均值比的90%置信區(qū)間均在75%～133%

5、之間,結(jié)果顯示兩種制劑具有生物等效性。阿托伐他汀、o-OAT和p-OAT的Cmax分別為10.6、7.64和0.397ng·mL-1,AUC0-t分別為51.7、92.3和13.8ng·h·mL-1。
　　 結(jié)論該方法同時測定了血漿樣品中阿托伐他汀及其鄰、對位羥基化代謝物,采用穩(wěn)定同位素內(nèi)標(biāo),適用于阿托伐他汀的臨床藥代動力學(xué)和制劑生物等效性研究。藥動學(xué)結(jié)果表明,中國受試者口服20mg阿托伐他汀后,與白人受試者口服40mg后原形藥