幽門螺桿菌毒力基因型與兒童胃十二指腸疾病關(guān)系以及毒力基因?qū)Ω委煹挠绊?pdf

1、目的：
　　H. pylori感染與兒童多種上消化道疾病密切相關(guān)。H. pylori毒力基因主要有cagA，vacA和iceA基因。H. pylori感染定植在胃黏膜后，導(dǎo)致一系列疾病的發(fā)生。隨著兒童感染H. pylori根除治療三聯(lián)療法的應(yīng)用，臨床出現(xiàn)了抗生素的耐藥菌株。研究表明，H. pylori毒力基因型和抗生素耐藥菌株的出現(xiàn)是影響H. pylori根除治療效果的兩個重要因素。本課題對江西地區(qū)患兒胃粘膜進行H. pylori

2、分離培養(yǎng)和藥敏實驗，檢測cagA，vacA及iceA基因型，H. pylori感染患兒采用三聯(lián)療法根除治療，以明確江西地區(qū)H. pylori菌株培養(yǎng)情況和抗生素的耐藥性，H. pylori毒力基因的優(yōu)勢基因型，研究H. pylori毒力基因型與兒童胃十二指腸疾病和耐藥性之間的關(guān)系，以及毒力基因型對根除治療的影響。
　　材料和方法：
　　1、研究對象
　　2014年7月～2015年8月因具有上消化道癥狀在江西省兒童醫(yī)院門

3、診就診和住院的患兒，共316例納入本研究，并進行胃鏡檢查和胃竇黏膜活檢。
　　2、H. pylori分離培養(yǎng)和藥敏實驗
　　胃黏膜活檢標本研磨后涂布于培養(yǎng)基表面，放置于三氣混合恒溫孵養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)獲得H. pylori陽性菌株，然后采用E-test法檢測阿莫西林、克拉霉素和甲硝唑的最低抑菌濃度（MIC）；利用K-B法檢測呋喃唑酮的敏感性。
　　3、H. pylori毒力基因PCR擴增
　　H. pylori菌株用QI

4、Aamp DNA mini kit試劑盒抽提H. pylori基因組，使用NanoDrop2000超微量分光光度計檢測所提取菌株基因組 DNA濃度。根據(jù)文獻中H. pylori毒力基因的引物序列進行PCR擴增，采用瓊脂糖凝膠電泳后，使用Bio-Rad Gel Doc XR+凝膠成像分析儀進行圖像分析。
　　4、H. pylori感染患兒采用質(zhì)子泵抑制劑加兩種抗生素的三聯(lián)療法根除治療。
　　結(jié)果：
　　1、H. pylo

5、ri分離培養(yǎng)情況及耐藥性分析
　　在316例患兒胃竇黏膜共培養(yǎng)出107株H. pylori菌株，檢出率33.9％，其中男性81例、女性26例，年齡分布1歲9個月至14歲。在慢性胃炎、十二指腸球炎、胃潰瘍和十二指腸球部潰瘍4組中H. pylori分離培養(yǎng)陽性檢出率分別為20.1%，44.8%，30.0%和52.8%（χ2=33.133，P＜0.001）；其中十二指腸球部潰瘍陽性檢出率高于慢性胃炎和胃潰瘍組（χ2=31.861，P＜0

6、.001；χ2=1.098， P=0.295），十二指腸球炎陽性率檢出高于慢性胃炎和胃潰瘍組（χ2=8.348，P=0.004；P=0.480）。在107株菌株中，97株完成藥敏實驗，對克拉霉素耐藥率20.6%，對甲硝唑耐藥率47.4%，對克拉霉素+甲硝唑二重耐藥率12.4%，未發(fā)現(xiàn)對阿莫西林和呋喃唑酮耐藥菌株；H. pylori對克拉霉素和甲硝唑2組間耐藥率的比較差異有統(tǒng)計意義（χ2=15.524，P＜0.001）。
　　2、H

7、. pylori毒力基因型與兒童胃十二指腸疾病之間的關(guān)系
　　在107株菌株中，cagA基因陽性檢出率為94.4%。在vacA基因亞型中， vacAs1a和vacAm2基因亞型陽性檢出率最高，分別74.8%和69.2%，0.9%菌株同時檢測出vacAm1和vacAm2基因亞型；在vacA基因的嵌合體中，vacAs1a/m2基因亞型陽性檢出率最高，51.4%（χ2=69.283，P＜0.001）；但是在所有菌株中未檢測出vacAsl

8、b和vacAs2基因亞型。iceA1和iceA2基因亞型單獨陽性檢出率分別為79.4%和9.3%（χ2=113.822，P＜0.001），其中7.5%菌株同時檢出iceA1和iceA2基因亞型。H. pylori毒力基因型在消化性潰瘍、慢性胃炎和十二指腸球炎3組間的陽性檢出率比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（ P＞0.05）；cagA/vacAs1a/m2基因組合型在消化性潰瘍、慢性胃炎和十二指腸球炎3組間的陽性檢出率比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義（χ2=

9、2.670，P=0.263）。
　　3、H. pylori毒力基因型與抗生素耐藥性之間的關(guān)系
　　H. pylori毒力基因在克拉霉素耐藥組、甲硝唑耐藥組、克拉霉素+甲硝唑二重耐藥組和抗生素敏感組4組間的陽性檢出率比較，差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P＞0.05）。
　　4、H. pylori毒力基因型與根除治療的關(guān)系
　　在107例患兒中，98例完成本研究治療觀察，9例失訪。H. pylori根除率按意向治療分析（ITT

10、）及試驗方案分析（PP）分別為64.5%和70.4%。H. pylori毒力基因型在根除治療成功組和根除治療失敗組的陽性檢出率的比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義（p＞0.05）。
　　結(jié)論：
　　1、H. pylori毒力基因型與兒童胃十二指腸疾病類型和耐藥無相關(guān)性；
　　2、江西地區(qū)兒童感染H. pylori優(yōu)勢基因亞型是cagA，vacAs1a/m2和iceA1， H. pylori感染存在不同基因亞型菌株混合感染；