魚藤酮對大鼠腎臟毒性及相關(guān)機制的研究.pdf

1、魚藤酮(rotenone)是一種天然的植物殺蟲劑和除螨劑，它廣泛的存在于植物的根皮部。其殺蟲譜廣害蟲不易產(chǎn)生抗性，而且它的藥效殘留期短，不易對環(huán)境產(chǎn)生污染。目前大部分對于魚藤酮的毒性研究都集中在中樞神經(jīng)系統(tǒng)尤其是帕金森病的發(fā)病機制上，但對它的毒理學研究報道較少。本試驗通過魚藤酮對大鼠的急性毒性試驗和亞慢性毒性試驗，研究其對腎臟的毒性損傷及其相關(guān)機制，為進一步探討魚藤酮對機體的毒理作用和魚藤酮的藥用開發(fā)提供理論基礎(chǔ)和試驗依據(jù)。
　　

2、急性毒性試驗選取清潔級雄性SD大鼠70只，體重為180～200 g。將其隨機分為7組，分別給予魚藤酮8、16、30、57、108、206 mg/kg· BW和相同劑量的DMSO溶液。采用一次性灌胃法給藥，給藥后觀察大鼠的毒性反應(yīng)，并用改良寇氏法計算LD50及95％可信限。對死亡大鼠進行剖檢，并在7d末將未死亡大鼠剖殺，在視檢觀察變化的同時，取心、肝、脾、腎、肺、胃等組織做HE染色觀察。
　　亞慢性毒性試驗選取清潔級SD雄性大鼠60

3、只，體重為160～180 g。將其隨機分為5組，即正常組、對照組(DMSO)、魚藤酮低劑量組（1 mg/kg）、魚藤酮中劑量組(2 mg/kg)、魚藤酮高劑量組(4 mg/kg)。連續(xù)灌胃28 d后，稱體重，眼球采血后脫頸處死動物，記錄腎重，計算腎指數(shù)。通過對血液生化指標尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)的測定和腎組織HE染色觀察魚藤酮對大鼠腎臟的損傷。通過對組織氧化應(yīng)激相關(guān)生化指標丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、活性氧

4、(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(GSH-Px)的測定來觀察其對腎組織氧化損傷的程度。通過檢測腎組織線粒體膜電位水平和電壓依賴性離子通道、細胞色素C、Caspase-9和Caspase-3的蛋白表達水平來觀察其對細胞凋亡的影響。
　　試驗結(jié)果表明:
　　(1)魚藤酮對SD大鼠的經(jīng)口急性毒性LD50為34.10 mg/kg·BW，LD5095％可信限為23.44～49.62 mg/kg·BW。染毒后，大

5、鼠急性毒性癥狀主要為:惡心、呼吸困難、抽搐、共濟失調(diào)，且呈明顯的量效關(guān)系。組織病理學變化主要為心肌細胞腫脹，空泡變形，胞漿可見粉染顆粒;肝臟中央靜脈淤血，肝細胞可見脂肪空泡;肺臟部分肺泡間隔增寬，炎細胞浸潤;腎臟腎小管上皮細胞可見空泡和粉染顆粒。
　　(2)魚藤酮亞慢性中毒可使大鼠體重顯著下降、腎指數(shù)顯著升高，血清BUN、Cr、UA含量升高，魚藤酮可使大鼠腎組織出現(xiàn)明顯的空泡變性和炎性細胞浸潤，細胞核部分淡染空泡化，部分細胞溶解，

6、說明魚藤酮可對大鼠腎組織造成一定損傷。腎組織SOD、GSH-Px活性降低，GSH、MDA、ROS含量升高，表明魚藤酮可引起腎組織的氧化損傷。魚藤酮可促使線粒體膜電位下降，使大鼠腎組織VDAC、細胞色素C、Caspase-9和Caspase-3蛋白表達增加，提示魚藤酮可能通過線粒體途徑誘導細胞凋亡。
　　結(jié)論:魚藤酮對SD大鼠經(jīng)口急性毒性LD50為34.10 mg/kg·BW，急性中毒后會廣泛的損害心、肝、肺、腎、胃等多種組織器官。