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1、目的:觀察魚(yú)藤素對(duì)胃癌AGS細(xì)胞抑制增殖和誘導(dǎo)凋亡的作用,初步探討其作用機(jī)制。 方法:體外培養(yǎng)人胃癌AGS細(xì)胞,采用MTT法檢測(cè)藥物對(duì)胃癌細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。用Hoechst33342/PI熒光染色觀察凋亡細(xì)胞的形態(tài)。Annexin V FITC/PI雙標(biāo)記法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率,流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞周期,細(xì)胞線粒體膜電位變化。用免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測(cè)魚(yú)藤素處理后AGS細(xì)胞p-Akt、COX-2、NF-κB和Caspase-3蛋白
2、的表達(dá)。 結(jié)果:魚(yú)藤素顯著抑制人胃癌AGS細(xì)胞的生長(zhǎng),呈濃度和時(shí)間依賴(lài)性;魚(yú)藤素(80nmol/L)處理AGS細(xì)胞48h后,熒光顯微鏡下觀察到,細(xì)胞體積縮小,核固縮,呈典型的凋亡形態(tài)學(xué)改變;Annexin V FITC/PI雙標(biāo)記法流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡顯示隨魚(yú)藤素濃度的增大,AGS細(xì)胞凋亡率明顯上升。流式細(xì)胞術(shù)分析結(jié)果表明不同濃度魚(yú)藤素(0,10,20,40,80,160nmol/L)處理AGS細(xì)胞48h,使細(xì)胞周期聚積于G0
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