淫羊藿總黃酮對喹啉酸誘導(dǎo)的人神經(jīng)母細(xì)胞瘤細(xì)胞毒性的保護(hù)作用.pdf

1、目的:探討淫羊藿總黃酮(Total flavonoids of epimedium，TFE)對喹啉酸(Quinolinicacid，QA)誘導(dǎo)的人神經(jīng)母細(xì)胞瘤(SH-SY5Y)細(xì)胞毒性的保護(hù)作用。
　　方法:QA對SH-SY5Y細(xì)胞的毒性作用:
　　將對數(shù)生長期的SH-SY5Y細(xì)胞分為:正常對照組、QA不同濃度組。0.5、1.0、2.5、5.0、10.0 mmol.L-1QA處理24h，四甲基偶氮唑鹽(MTT)法測定細(xì)胞存活

2、率。
　　TFE對QA誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞毒性的保護(hù)作用:
　　將對數(shù)生長期的SH-SY5Y細(xì)胞分為:正常對照組、溶劑對照組、QA模型組、TFE低、中、高濃度組。TFE低、中、高濃度組分別加入終濃度為0.125、0.25、0.50mg.L-1的TFE預(yù)處理24h，再與模型組同時加入終濃度為1 mmol.L-1QA繼續(xù)培養(yǎng)24h。MTT法測定細(xì)胞存活率;Hoechst33258染色檢測細(xì)胞凋亡;比色法測定超氧化物歧化酶(S

3、uperoxide dismutase，SOD)、谷胱甘肽過氧化物酶(Glutathione peroxidase，GSH-Px)的活性和丙二醛(Malondialdehyde，MDA)含量;流式細(xì)胞儀(Flow cytometry，F(xiàn)CM)檢測線粒體膜電位(Mitochondrial membrane potential，△Ψm)和細(xì)胞內(nèi)鈣離子濃度([Ca2+]i)。
　　結(jié)果:QA對SH-SY5Y細(xì)胞的毒性作用結(jié)果:
　

4、　MTT活性測定，隨著QA濃度的增加，細(xì)胞活性逐漸下降，當(dāng)QA為1 mmol.L-1及以上濃度時，細(xì)胞活性開始明顯下降(P＜0.01)。
　　TFE對QA誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞毒性的保護(hù)作用結(jié)果:
　　MTT法檢測，與正常組比較，模型組細(xì)胞存活率顯著降低（P＜0.01）;與模型組和0.125 mg.L-1TFE組細(xì)胞存活率比較，0.25、0.50 mg.L-1的TFE組細(xì)胞存活率顯著升高(P＜0.01);Hoechst33

5、258染色檢測結(jié)果，與正常組比較，模型組細(xì)胞呈現(xiàn)細(xì)胞核聚集濃縮、致密濃染的凋亡細(xì)胞增加;與模型組和0.125 mg.L-1TFE組比較，0.25、0.50 mg.L-1的TFE組呈現(xiàn)細(xì)胞核聚集濃縮、致密濃染的凋亡細(xì)胞減少;比色法檢測結(jié)果，與正常組比較，模型組細(xì)胞SOD和GSH-Px活性顯著降低，MDA含量顯著升高;與模型組和0.125 mg.L-1TFE組比較，0.25、0.50mg.L-1的TFE組SOD和GSH-Px活性顯著提高(P

6、＜0.01)，MDA含量顯著降低(P＜0.01);FCM結(jié)果顯示，與正常組比較，模型組細(xì)胞△Ψm顯著降低，[Ca2+]i顯著升高;與模型組和0.125 mg.L-1TFE組比較，0.25、0.50mg.L-1的TFE組細(xì)胞△Ψm顯著升高(P＜0.01)，[Ca2+]i顯著降低(P＜0.01)。
　　結(jié)論:QA對體外培養(yǎng)的SH-SY5Y細(xì)胞有毒性作用，TFE對QA誘導(dǎo)的SH-SY5Y細(xì)胞毒性有保護(hù)作用，減少SH-SY5Y細(xì)胞的凋亡，