柚皮素對淫羊藿苷吸收的影響及其機制研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察柚皮素對淫羊藿苷吸收的影響并探討其機制。
  方法:1、雄性SD大鼠36只,隨機分成3組,淫羊藿苷組(ICA組)、柚皮素50 mg/kg+淫羊藿苷組(Nar50+ICA組)和柚皮素200 mg/kg+淫羊藿苷組(Nar200+ICA組)。淫羊藿苷組給予淫羊藿苷(100 mg/kg)行十二指腸給藥1次,給藥結束后在1、5、10、20、30、40、50、60、75、90、120、180、240 min(每個時間點4只大鼠)取

2、血。柚皮素+淫羊藿苷組先分別給予柚皮素分別予以50 mg/kg和200 mg/kg灌胃,每天二次,連續(xù)7天,末次給藥3小時后十二指腸給予淫羊藿苷100 mg/kg,按上述時間點取血。RP HPLC-DAD檢測其淫羊藿苷的血藥濃度。
  2、制備完整的Caco-2細胞模型,模型成功后,給予柚皮素(50、100、200μmol/L)與Caco-2細胞共孵育24小時后,將淫羊藿苷(100μmol/L)與Caco-2細胞共孵育3小時,分別

3、收集刷狀緣側、基底側及細胞樣本,UPLC-MS/MS法檢刷狀緣側和基底側寶藿苷濃度。Real Time PCR法檢測細胞中轉運體基因表達情況。
  3、雄性SD大鼠,隨機分成5組,空白組(Control)、淫羊藿苷組(ICA組)、柚皮素50 mg/kg+淫羊藿苷組(Nar50+ICA組)、柚皮素100 mg/kg+淫羊藿苷組(Nar100+ICA組)和柚皮素200 mg/kg+淫羊藿苷組(Nar200+ICA組)每組5只。淫羊藿苷

4、組給予含淫羊藿苷(0.15μmol/L)的人工腸液行十二指腸至回腸循環(huán)30 min,柚皮素+淫羊藿苷組先給予柚皮素(50、100、200 mg/kg)灌胃,每天二次,連續(xù)7天,末次給藥3 h后給予含淫羊藿苷(0.15μmol/L)的人工腸液行十二指腸至回腸循環(huán)30min??瞻捉M給予空白人工腸液循環(huán)30 min。循環(huán)結束后取腸組織和肝門靜脈取血。UPLC-MS/MS法檢測血漿、腸組織中寶藿苷的濃度。Real Time PCR法檢測大鼠十二

5、指腸組織轉運體基因表達情況。Western Blot法檢測大鼠十二指腸組織中轉運體蛋白表達情況。
  結果:1、柚皮素對淫羊藿苷血藥濃度的影響:與ICA組相比,Nar50+ICA組在10 min以前血藥濃度明顯高于ICA組。20 min后與ICA組無明顯差異。Nar200+ICA組在10 min以前低于ICA組。
  2、柚皮素對淫羊藿苷轉運的影響:在刷狀緣側,與ICA組相比,Nar100+ICA組、Nar200+ICA組I

6、CS含量明顯高于ICA組,分別為2倍、1.5倍;ADI含量分別增高了約3倍、1.5倍。在基底端側,與ICA組相比,不同劑量的柚皮素組ICS的含量沒有明顯變化。Real-Time PCR檢測結果表明,與空白組比較,Nar50+ICA組Abcg5 mRNA表達水平增高,均增高了約2倍。Nar50+ICA組、Nar100+ICA組Mdr1a mRNA表達水平均增高了約2.5倍,Oct3 mRNA表達無明顯變化。
  3、柚皮素對淫羊藿苷

7、吸收的影響:與 ICA組相比,Nar50+ICA組、Nar100+ICA組、Nar200+ICA組在血液中的寶藿苷含量明顯低于ICA組,均降低了約1.4倍。在十二指腸組織中寶藿苷的含量降低了約1.5倍。Real-Time PCR檢測結果表明,與空白組比較,Nar50+ICA組、Nar100+ICA組、Nar200+ICA組Abcg5、Mdr1a mRNA表達水平增高。 Western Blot檢測結果表明:與空白組相比,Nar50+IC

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