淫羊藿總黃酮對去勢雄兔干眼癥淚腺的保護(hù)作用.pdf

1、目的：在成功構(gòu)建雄兔干眼癥模型的基礎(chǔ)上，觀察淫羊藿總黃酮對去勢雄兔干眼癥淚腺的保護(hù)作用及凋亡相關(guān)基因蛋白表達(dá)的影響，探討淫羊藿總黃酮抗雄激素水平下降所致干眼癥的機(jī)制，擴(kuò)增中醫(yī)藥治療干眼癥的臨床應(yīng)用。
　　方法：(1)以去勢的方法構(gòu)建雄兔干眼癥模型，采用正交設(shè)計(jì)，隨機(jī)對照的方法進(jìn)行試驗(yàn)研究。取健康2月齡，體重2.0-2.5kg雄性日本大耳兔60只（貴陽醫(yī)學(xué)院動(dòng)物中心提供），隨機(jī)分為A1、B1、C1、D1、E1、A2、B2、C2、D2

2、、E2、A3、B3、C3、D3、E3共15組，每組5只。A代表正常組；B代表假手術(shù)組；C代表模型對照組；D代表雄激素(丙酸睪酮)治療組；E淫羊藿總黃酮治療組。1代表飼養(yǎng)一個(gè)月；2代表飼養(yǎng)兩個(gè)月；3代表飼養(yǎng)三個(gè)月。（2）分別于造模前、末次給藥后行Schirmer試驗(yàn)（SIT）；耳緣靜脈采血，測血清黃體生成素（LH）。取材后進(jìn)行HE染色，在光鏡及透射電鏡下觀察淚腺細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化；運(yùn)用免疫組織化學(xué)方法測定淚腺組織中免疫、炎癥反應(yīng)因子及相關(guān)基因

3、蛋白的表達(dá)；用原位雜交方法測定淚腺組織中雄激素受體(AR)密度。
　　結(jié)果：（1）各組SIT測量：C組濾紙濕長縮短，與去勢前差異有顯著性(P<0.05)，隨時(shí)間的延長差異無顯著性(P>0.05)。D組濾紙濕長與B組比較增長明顯，差異有顯著性(P<0.05)。E組濾紙濕長與B組比較增長明顯，差異有顯著性(P<0.05)。（2）LH檢測結(jié)果：A1、B1、C1、D1、E1各組間LH含量有顯著性差異，隨時(shí)間延長各組LH含量沒有顯著性差異。

4、（3）HE染色及透射電鏡結(jié)果顯示：A、B組淚腺細(xì)胞形態(tài)結(jié)構(gòu)無明顯改變；C組淚腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)有明顯改變，且隨時(shí)間增長逐漸加重；D、E兩組間淚腺細(xì)胞結(jié)構(gòu)改變較 C組明顯減輕。（4）免疫組織化學(xué)方法結(jié)果顯示：A、B、D、E組淚腺導(dǎo)管及淚腺上皮細(xì)胞中Bax、TNF-α表達(dá)明顯低于C組；而TGF-β1、Bcl-2表達(dá)明顯高于C組。（5）原位雜交方法結(jié)果顯示：A、B、D、E組雄激素受體密度均高于 C組。
　　結(jié)論：初步證實(shí)淫羊藿總黃酮能減輕去勢雄