春蘭的組織培養(yǎng)與遺傳轉(zhuǎn)化的初步研究.pdf

1、我國習(xí)見栽培的地生蘭花，皆為蘭屬，多年生常綠草本植物；蘭屬約四十種，主要分布亞洲熱帶和亞熱帶地區(qū)，少數(shù)分布大洋洲和非洲。我國有20種及其變種，是本屬的分布中心。蘭花是我國的傳統(tǒng)名花，是著名的珍貴盆花，因此，對國蘭進(jìn)行組織培養(yǎng)、遺傳轉(zhuǎn)化的研究具有重要的意義。 本試驗以春蘭為試材，系統(tǒng)地研究了離體培養(yǎng)中各種影響因子對類原球莖和芽的增殖、生長、生根以及長期培養(yǎng)后生長勢恢復(fù)的影響；同時，對農(nóng)桿菌介導(dǎo)的春蘭轉(zhuǎn)基因進(jìn)行了初步研究。主要研究結(jié)

2、果如下： (1)在春蘭類原球莖途徑的研究過程中，利用春蘭根狀莖的莖段及嫩芽，在添加了5.O mg/L NAA的MS基本培養(yǎng)基上，成功誘導(dǎo)獲得了綠色的質(zhì)地優(yōu)良的類原球莖；并進(jìn)一步探索了類原球莖增殖的最佳生長調(diào)節(jié)劑濃度為BA 0.1 mg／L；在對不同有機(jī)添加物的對比試驗中發(fā)現(xiàn)，酵母添加物和蛋白胨對類原球莖鮮重的增加和增殖效果均較佳，其中以1.0 g／L的蛋白胨最佳。 (2)在芽途徑的組織培養(yǎng)研究中，優(yōu)化NAA濃度(5.0

3、mg/L)，誘導(dǎo)叢生芽的產(chǎn)生，提高了芽的增殖率；同時發(fā)現(xiàn)，影響生長勢減弱的春蘭生根的關(guān)鍵因素是芽的高度；當(dāng)然，適宜濃度的蔗糖(20g／L)也是春蘭生根所必需的。 (3)通過對類原球莖和生長勢減弱材料芽增殖的研究發(fā)現(xiàn)，鮮重增加率／增殖率(F／P值)是衡量類原球莖或芽正常生長與否的一個重要指標(biāo)。類原球莖的F／P值≥0.6時，類原球莖生長健壯，色澤深綠；而F／P值＜0.6時，類原球莖生長偏弱，色澤黃綠，部分黃化。而芽增殖的適宜的F／P