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文檔簡(jiǎn)介
1、目的: 利用基因工程原理構(gòu)建攜帶血紅素加氧酶-1基因的乳酸乳球菌工程菌;觀察其減輕內(nèi)毒素血癥大鼠腸道癥反應(yīng)及腸黏膜屏障的保護(hù)效應(yīng)。 方法: 按隨機(jī)數(shù)字表法將32只健康清潔級(jí)雄性SD大鼠分為3組:攜帶HO-1基因的乳酸乳球菌工程菌灌胃組(LL-HO-1組,n=8)、乳酸乳球菌灌胃組(LL組,n=8)、谷氨酰胺灌胃組(Glu組,n=8)、鋅原卟啉阻斷劑組(LL-HO-1+ZnPP組,n=8)。分別給予攜帶HO-1基因的乳酸乳球菌、乳
2、酸乳球菌或谷氨酰胺,每日一次,共四次。第四天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素,其中鋅原卟啉阻斷劑組在腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素前通過(guò)尾靜脈注入鋅原卟啉。12小時(shí)后取末端回腸,檢查腸組織病理學(xué)變化,并檢測(cè)腸組織髓過(guò)氧化物酶活性、腫瘤壞死因子-α、白細(xì)胞介素-10含量和血紅素加氧酶-1的表達(dá)量。另取32只健康清潔級(jí)雄性SD大鼠同樣分為四組,分別給予攜帶HO-1基因的乳酸乳球菌工程菌、乳酸乳球菌或谷氨酰胺,每日一次,共四次灌胃后,于第四天腹腔內(nèi)注射內(nèi)毒素,觀察其48小
3、時(shí)的生存率。 結(jié)果: 與LL-HO-1+ZnPP組比較,LL-HO-1組和Glu組的生存率均明顯升高(P<0.01);與LL-HO-1+ZnPP組、LL組比較,LL-HO-1組和LL-HO-1+ZnPP組組的Chiu's評(píng)分(P<0.01)和腸組織MPO活性明顯降低(P<0.01),腸組織TNF-α的含量明顯減低(P<0.01),IL-10的含量卻顯著的升高(P<0.01);與LL組比較,LL-HO-1組、LL-HO-1+ZnP
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