血紅蛋白與有機(jī)物、無機(jī)離子作用的光譜性及分析應(yīng)用研究.pdf

1、血紅蛋白的分析測試和理論研究在生命科學(xué)、生物化學(xué)和臨床醫(yī)學(xué)中具有重要的意義。由于血紅蛋白分子中含有酪氨酸、色氨酸和苯丙氨酸殘基，能夠發(fā)射熒光，因此可采用熒光光譜法進(jìn)行研究。但對微量分析而言，由于血紅蛋白的內(nèi)源熒光微弱，在靈敏度方面常常不能滿足需要。而某些表面活性劑、金屬離子對血紅蛋白的熒光有較強(qiáng)的增敏作用，可使測定靈敏度有很大的提高。本文的工作分為兩部分，首先探討了各種表面活性劑、常見離子、稀土離子對血紅蛋白熒光性質(zhì)的影響，然后根據(jù)表面

2、活性劑和金屬離子的協(xié)同增敏作用，建立了測定血紅蛋白的新體系，并應(yīng)用于實(shí)際樣品的測定。另一方面從理論上研究了杯芳烴類化合物、生物堿類和抗生素藥物與血紅蛋白的作用機(jī)理及作用方式。計算了猝滅常數(shù)、熱力學(xué)參數(shù)及熒光給體一受體間的距離等物理參數(shù)，由此可探討蛋白質(zhì)分子在人體生理條件下與這些化合物相互作用的規(guī)律，為生命科學(xué)的研究提供一定的信息和依據(jù)。 本論文的主要內(nèi)容如下： 1．運(yùn)用熒光光譜法研究了各種表面活性劑、常見離子與血紅蛋白相

3、互作用時對血紅蛋白熒光性質(zhì)的影響，并探討了其增敏、猝滅作用機(jī)理及對血紅蛋白熒光峰的影響。其中陽離子表面活性劑十六烷基三甲基溴化銨與Zn<'2+>一起對血紅蛋白有很強(qiáng)的協(xié)同增敏作用，由此建立了一種測定血紅蛋白的新方法，用于人血清中血紅蛋白含量的測定，結(jié)果滿意。 2．研究了多種稀土離子對血紅蛋白、脫氧血紅蛋白熒光性質(zhì)的影響。發(fā)現(xiàn)稀土離子對血紅蛋白的熒光強(qiáng)度有微弱的猝滅作用，且有的稀土離子可使血紅蛋白的熒光峰紅移。而稀土離子對脫氧血紅

4、蛋白的影響較之血紅蛋白更明顯，Pr<'3+>、Eu<'3+>、Gd<'3+>、Tb<'3+>、Dy<'3+>、Er<'3+>對脫氧血紅蛋白有明顯的熒光增敏作用，La<'3+>、Nd<'3+>、Sm<'3+>、Y<'3+>對脫氧血紅蛋白有不同程度的猝滅作用。同時稀土離子可使脫氧血紅蛋白的熒光峰紅移。另外還探討了其增敏、猝滅及對熒光峰的影響機(jī)理。 3．研究了對磺酸基杯[4]芳烴、對磺酸基杯[6]芳烴、對磺酸基杯[8]芳烴對血紅蛋白熒

5、光性質(zhì)的影響和作用機(jī)理、作用方式。由Stem-Volmer方程及紫外-可見吸收光譜圖確定對磺酸基杯芳烴對血紅蛋白的熒光猝滅過程為動態(tài)猝滅，求出了猝滅常數(shù)。由熱力學(xué)參數(shù)判斷二者之間的作用力主要是疏水作用力。依據(jù)能量轉(zhuǎn)移理論得出熒光給體(血紅蛋白) -受體(對磺酸基杯芳烴)間的距離r。 4．模擬人體生理條件，研究了生物堿(咖啡因、茶堿、秋水仙堿)、抗生素藥物(洛美沙星)對血紅蛋白熒光性質(zhì)的影響。判斷了其猝滅機(jī)理，計算了猝滅常數(shù)、熱力