誘導血紅素氧合酶-1表達及雷帕霉素抑制PDGF誘導的大鼠平滑肌細胞表型轉化的試驗研究.pdf

1、血管移植術、血管成形術后再狹窄、高血壓病和動脈粥樣硬化形成的一個共同病理過程是血管內膜增生，這種增生以血管中膜VSMCs向內膜浸潤和增殖為主要特征。在VSMCs增殖之前，有一個明顯的表型改變的過程。PDGF是VSMCs分化和增殖的有絲分裂原，能夠抑制收縮蛋白SM-α-actin的表達，同時啟動VSMCs的DNA合成，促進VSMCs由分化表型向收縮表型轉化。而HO-1是熱休克蛋白家族成員，是體內重要的內源性保護蛋白之一，可以明顯抑制平滑肌

2、細胞增殖。雷帕霉素可以對內皮細胞的增殖和分化有抑制作用，并且可以明顯抑制VSMCs的增殖。已被廣泛應用于藥物洗脫支架以預防血管成型術后再狹窄。為了觀察HO-1和雷帕霉素對PDGF誘導的大鼠VSMCs表型轉變的影響和對比HO-1與雷帕霉素作用結果的差別，設計了本試驗研究。 目的：觀察HO-1與雷帕霉素對PDGF誘導的大鼠VSMCs表型轉化的作用。 方法：原代大鼠VSMCs分離培養(yǎng)，給予PDGF-BB誘導VSMCs表型轉化。

3、同時給予不同劑量的血紅素氧合酶誘導劑氯血紅素誘導HO-1的表達，和雷帕霉素共培養(yǎng)24小時。免疫熒光染色后應用激光共聚焦顯微鏡觀察各組SM-α-actin和PCNA的表達，計算各組熒光強度，觀察在不同處理條件下對VSMCs表型轉化的影響。 結果：PDGF-BB20nmol/mL作用原代VSMCs 24h后，SM-a-actin與PCNA免疫熒光染色與對照組相比較發(fā)現SM-a-actin表達減弱，PCNA表達增強。氯血紅素誘導HO-

4、1后可以抑制PDGF-BB誘導的VSMCs表型改變，并且隨劑量的增加，抑制強度增加。較低劑量的雷帕霉素可以抑制PDGF誘導的VSMCs表型轉化。 結論： 1、PDGF-BB亞型可以促進原代培養(yǎng)的大鼠VSMCs由收縮表型向合成表型的轉化。 2、大鼠VSMCs可能在體內即存在部分合成表型，并且在體外培養(yǎng)的過程中有自發(fā)性去分化改變。 3、給予氯血紅素誘導HO-1表達可以對抗PDGF-BB誘導的大鼠VSMCs表型