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文檔簡介
1、目的:
研究大鼠急性脊髓損傷后血紅素氧合酶-1在脊髓組織中表達(dá)的變化。
方法:
參照Allen法建立SD大鼠脊髓損傷模型(使用10g的金屬棒從2.5cm的高度垂直打擊SD大鼠的T9-T10脊髓段),45只健康的SD大鼠隨機(jī)分為三組:正常組(不做任何處理)、假手術(shù)組(僅做椎板切除術(shù))、損傷組(SCI組)分為0.5h.4h.8h.16h.24h.48h及72h組。各組SD大鼠均為雌雄各半,為保證各實(shí)
2、驗(yàn)大鼠具有可比性,均于術(shù)后動(dòng)物麻醉清醒時(shí)給予Tarlov評(píng)分一次,SCI組Tarlov評(píng)分為5分者大鼠剔除實(shí)驗(yàn)(完全正常者沒有評(píng)估的價(jià)值),Tarlov評(píng)分為4分及以下者大鼠繼續(xù)實(shí)驗(yàn),并及時(shí)補(bǔ)充相應(yīng)組剔除的實(shí)驗(yàn)大鼠數(shù)量。每組在損傷后開始計(jì)時(shí),到相應(yīng)時(shí)間點(diǎn)處死動(dòng)物,對(duì)損傷后早期不同時(shí)間點(diǎn)應(yīng)用免疫組化、病理學(xué)及圖像分析檢測HO-1蛋白的表達(dá)。應(yīng)用化學(xué)比色法檢測不同時(shí)間點(diǎn)脊髓中HO活性的變化。
結(jié)果:
本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)S
3、CI組、假手術(shù)組及正常組中的脊髓組織均發(fā)現(xiàn)有HO-1的表達(dá)。棕黃色或棕褐色為HO-1免疫及原位雜交的陽性著色,這種著色位于細(xì)胞漿及突起的根部。在假手術(shù)組及正常對(duì)照組大鼠脊髓中,HO-1僅有少量的表達(dá),其主要位于脊髓前角的運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元,呈散在的分布。SCI組在損傷后4h時(shí)HO-1的表達(dá)增加,在16h達(dá)到高峰,而48h時(shí)仍有表達(dá),其主要的分布區(qū)域位于中央管周圍的灰質(zhì)和前角,也可見于白質(zhì)的外側(cè)索以及背側(cè)柱的膠質(zhì)細(xì)胞。而損傷段陽性的染色區(qū)域與其出
4、血范圍相似,并波及到損傷頭側(cè)段、損傷尾側(cè)段背索。SCI組各時(shí)間點(diǎn)的HO-1的表達(dá)與假手術(shù)組及正常組相比較,除0.5h時(shí)間點(diǎn)大鼠脊髓組織中的HO-1的表達(dá)差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義外,其余時(shí)間點(diǎn)的HO-1表達(dá)的比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。
結(jié)論:
1.大鼠脊髓損傷后,損傷的脊髓組織中HO-1的表達(dá)增加,表明脊髓損傷能誘導(dǎo)HO-1的表達(dá)。
2.HO-1在脊髓損傷后有明顯的高表達(dá),其參于了脊髓損傷的病理
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